[發(fā)明專利]抗突觸泡蛋白的特異結(jié)合成員無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310028974.6 | 申請(qǐng)日: | 2005-03-29 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103130895A | 公開(公告)日: | 2013-06-05 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 馬修.賴特;安迪.波特 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 阿伯丁大學(xué)理事會(huì) |
| 主分類號(hào): | C07K16/28 | 分類號(hào): | C07K16/28;C12N15/13;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;C12N7/01;C12P21/02;C40B30/04;A61K39/395;A61P1/16;G01N33/563 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105 | 代理人: | 史悅 |
| 地址: | 英國(guó)蘇格*** | 國(guó)省代碼: | 英國(guó);GB |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 突觸 蛋白 特異 結(jié)合 成員 | ||
1.一種包含抗體抗原結(jié)合位點(diǎn)的特異結(jié)合成員,其中所述結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合如序列SEQ?ID?NO:9所示的氨基酸序列YPFRLHQVYFDAPSC內(nèi)的突觸泡蛋白表位;
其中所述特異結(jié)合成員包括:
抗體VH區(qū),其選自下組:(1)如序列SEQID?NO.2所示的C1-3VH區(qū)和(2)包含具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.12的VH?CDR3,具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.10的VH?CDR1,和具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.11的VH?CDR2的VH區(qū);和
抗體VL區(qū),其選自下組:(1)如序列SEQ?ID?NO.4所示的C1-3VL區(qū)和(2)包含具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.13的VL?CDR1,具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.14的VL?CDR2,和具有氨基酸序列SEQ?ID?NO.15的VL?CDR3的VL區(qū)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異結(jié)合成員,其包括如序列SEQ?ID?NO.2所示的C1-3VH區(qū)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的特異結(jié)合成員,其包括如序列SEQ?ID?NO.4所示的C1-3VL區(qū)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的特異結(jié)合成員,其包括scFv抗體分子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的特異結(jié)合成員,其包括抗體恒定區(qū)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的特異結(jié)合成員,其包括完整抗體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任意一項(xiàng)所述的特異結(jié)合成員,其包括額外氨基酸,從而除了提供結(jié)合抗原的能力外還提供了另外的功能特性。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的特異結(jié)合成員,其任選通過肽鍵或接頭與可檢測(cè)的標(biāo)記物、酶、或毒素連接。
9.根據(jù)權(quán)利要求8中所述的特異結(jié)合成員,其與毒素連接,其中所述毒素選自三丁基-錫和膠霉毒素。
10.根據(jù)權(quán)利要求8中所述的特異結(jié)合成員,其與可檢測(cè)的標(biāo)記物連接,其中所述可檢測(cè)的標(biāo)記物是FITC。
11.一種分離的核酸,其包含編碼根據(jù)權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的特異結(jié)合成員的核苷酸序列。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的分離的核酸,其包含選自SEQ?ID?NO.1和SEQ?IDNO.3的核苷酸序列。
13.一種用根據(jù)權(quán)利要求11或12中任一項(xiàng)所述的核酸轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。
14.一種生產(chǎn)根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的包含抗體抗原結(jié)合位點(diǎn)的特異結(jié)合成員或抗體VH或VL區(qū)的方法,該方法包括在生產(chǎn)所述的特異結(jié)合成員的條件下,培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求13中所述的宿主細(xì)胞。
15.根據(jù)權(quán)利要求14中所述的方法,還包括分離和/或純化所述的特異結(jié)合成員。
16.根據(jù)權(quán)利要求14或權(quán)利要求15中所述的方法,還包括將特異結(jié)合成員配制成含有至少一種附加成分的組合物。
17.獲得一種或多種如權(quán)利要求1所述的特異結(jié)合成員的方法,該方法包括將特異結(jié)合成員的文庫(kù)與抗原接觸,并篩選能結(jié)合所述抗原的文庫(kù)中的一種或多種特異結(jié)合成員,
其中所述特異結(jié)合成員每個(gè)包含:
選自下組的抗體VH區(qū):(1)SEQ?ID?NO.2所示的C1-3VH區(qū),和(2)VH區(qū),其包含具有SEQ?ID?NO.12的氨基酸序列的VH?CDR3,具有SEQ?ID?NO.10的氨基酸序列的VH?CDR1,和具有SEQ?ID?NO.11的氨基酸序列的VHCDR2;和
選自下組的抗體VL區(qū):(1)SEQ?ID?NO.4所示的C1-3VL區(qū),和(2)VL區(qū),其包含具有SEQ?ID?NO.13的氨基酸序列的VL?CDR1,具有SEQ?ID?NO.14的氨基酸序列的VL?CDR2,和具有SEQ?ID?NO.15的氨基酸序列的VLCDR3,而且
其中所述抗原包含在如序列SEQ?ID?NO:9所示的氨基酸序列YPFRLHQVYFDAPSC中的表位。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法,其中結(jié)合突觸泡蛋白的特異結(jié)合成員是包含VH區(qū)和VL區(qū)的抗體片段。
19.根據(jù)權(quán)利要求18中所述的方法,其中抗體片段是scFv抗體分子。
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