[發明專利]大草蛉卵黃原蛋白新基因及應用在審
| 申請號: | 201310027144.1 | 申請日: | 2013-01-25 |
| 公開(公告)號: | CN103966225A | 公開(公告)日: | 2014-08-06 |
| 發明(設計)人: | 曾凡榮;劉昌燕;毛建軍 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號: | C12N15/12 | 分類號: | C12N15/12;C12N15/10;C07K14/435 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100094 北京市海淀區圓*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 大草蛉 卵黃 蛋白 基因 應用 | ||
1.一種大草蛉卵黃原蛋白基因Vg的cDNA,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所述。
2.如權利要求1所述多核苷酸編碼的蛋白質,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.一種如權利要求1所述的大草蛉卵黃原蛋白基因cDNA克隆方法,包括以下步驟:
(1)從大草蛉中提取總RNA,然后反轉錄合成cDNA;
(2)根據全變態昆蟲Vg基因保守序列設計簡并引物;
(3)以步驟(1)得到的cDNA為模板,用步驟(2)所述的引物進行PCR擴增,得到擴增片段;
(4)根據3′末端序列的結果,設計5′-RACE特異性引物;
(5)按clontech5′-RACE試劑盒操作步驟反轉錄進行cDNA的合成;
(6)以cDNA為模板,PCR擴增大草蛉Vg基因的5′-末端序列;
(7)將所述基因的3’和5’端片段拼接,得到權利要求1所述的cDNA。
4.如權利要求1和2所述的應用,其特征在于:應用的材料中包含權利要求1所述的多核苷酸序列或權利要求2所述的蛋白質,例如利用RNAI干擾研究技術研究卵黃原蛋白基因的生理功能。
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