[發明專利]與大口黑鱸孵化率相關的分子標記及其應用

無效

• 申請號: 201310026074.8
• 申請日: 2013-01-23
• 公開（公告）號: CN103103183A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 李勝杰;白俊杰;韓林強;馬冬梅;葉星;樊佳佳;姜鵬;全迎春;于凌云
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院珠江水產研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 張海文

1.大口黑鱸隱性缺失致死基因片段A，其位于大口黑鱸GHRH基因啟動子序列上的第97～162bp。

2.根據權利要求1所述的基因片段A，其特征在于，所述大口黑鱸GHRH基因啟動子序列如SEQ?ID?NO:1所示，其第97～162bp上的大口黑鱸隱性缺失致死基因片段A的序列如SEQ?ID?NO:2所示。

3.權利要求1所述的基因片段A作為分子標記在輔助篩選高孵化率大口黑鱸親本上的應用。

4.一種輔助篩選高孵化率大口黑鱸親本的方法，包括檢測大口黑鱸樣品的基因組DNA，篩選含有權利要求1所述隱性缺失致死基因片段A的純合體即可。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）根據權利要求1所述基因片段A的5’和3’側翼序列，設計并合成引物；

2）利用步驟1）的引物對大口黑鱸樣品的基因組DNA進行擴增；

3）根據擴增結果篩選親本：基因組DNA中含有基因片段A的純合體即為高孵化率大口黑鱸親本。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所用引物的序列如下所示：

P1：GGCCCGGGCTGGTCTGTTAAATACA（SEQ?ID?NO:3）

P2：GCGCAACACAAGAGCACATTGCTT（SEQ?ID?NO:4）

當PCR產物為316bp的單一條帶時，該樣品為含有基因片段A的純合體，當PCR產物出現316bp和250bp兩種DNA條帶時，該樣品為含有基因片段A的雜合體。

7.一種用于輔助篩選高孵化率大口黑鱸親本的PCR引物，是根據大口黑鱸GHRH基因啟動子序列（SEQ?ID?NO:1）第97～162bp上的大口黑鱸隱性缺失致死基因片段A（SEQ?ID?NO:2）的5’和3’側翼序列設計并合成，其特征在于，當大口黑鱸樣品基因型為含有基因片段A的純合體時，該引物的PCR產物為單一條帶；當樣品基因型為雜合體時，則該引物的PCR產物有兩條帶，其中一條比另一條長66bp。

8.根據權利要求8所述的PCR引物，其特征在于，所述引物的序列如下所示：

P1：GGCCCGGGCTGGTCTGTTAAATACA（SEQ?ID?NO:3）；

P2：GCGCAACACAAGAGCACATTGCTT（SEQ?ID?NO:4）。

9.一種用于輔助篩選高孵化率大口黑鱸親本的試劑盒，其包括權利要求7或8所述的PCR引物。