[發明專利]一種固定化微生物溢油修復劑的制備方法

在審

• 申請號: 201310016817.3
• 申請日: 2013-01-16
• 公開（公告）號: CN103923905A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 陳慶國;劉梅;胡海燕;趙晟
• 申請（專利權）人: 浙江海洋學院
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/10;C02F3/34;C01B31/08;C12R1/01;C02F101/32;C02F103/08
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛

1.一種固定化微生物溢油修復劑的制備方法，其特征在于以海藻酸鈉-CaCl₂-稻草秸稈基活性碳作為載體進行包埋，具體步驟為：

1）制備稻草秸稈基活性碳；

2）將適量的稻草秸稈基活性碳與種子菌液質量比1:2～1:5混合進行吸附,直至吸附飽和，形成菌懸液；

3）往上述10mL菌懸液中加入30～40℃的已滅菌的100mL、濃度為3（wt）%～4（wt）%的海藻酸鈉溶液，混勻后，用注射器吸取并注入到500mL、濃度為3（wt)%～4(wt)%的CaCl₂溶液中分散成球，交聯12h～24h，得到固定化微生物微球；

4）最后將得到的固定化微生物微球用生理鹽水沖洗2～4遍，即為成品。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述稻草秸稈基活性碳的制備過程為：

A、將原料稻草秸稈清理、篩揀、干燥、粉碎，過25～35目篩，備用；

B、稱取上述粉碎好的稻草秸稈，加入到質量分數為30-50%的氯化鋅活化劑溶液，稻草基活性碳與氯化鋅溶液的質量比為1:2～1:5，攪拌混勻，將混勻的料液在室溫下浸漬約0.5～1.5h；

C、將浸漬好的料液放入馬福爐中進行活化；

D、將活化好的樣品從馬福爐中取出，冷卻后，將樣品倒入11～13mol/L的濃鹽酸與水體積比為1:8～10的鹽酸溶液中浸泡15-30min，再將樣品用70～80℃熱水洗滌至pH中性。

E、將洗滌好的樣品放入電熱鼓風烘箱中，在100～120℃烘3～5h，取出后放在干燥器中冷卻；

F、將制得的活化后的樣品粉碎過150～250目篩，制得稻草秸稈基活性碳。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述步驟C中的活化溫度為500～700℃，從室溫升至所需活化溫度的升溫速率為40～60℃/min，保溫30～90min。

4.根據權利要求1所述種子菌液是以短短芽孢桿菌D-1作為石油烴降解菌，種子菌液的濃度為5～8.5×10⁹cell/g。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述使用海藻酸鈉的濃度為3（wt）%～4（wt）%，CaCl₂溶液濃度為3（wt）%～4（wt）%，稻草秸稈基活性碳所占固定化微球的質量百分比濃度為0.6-1.8%，所述固定化微生物溢油修復劑中包埋的微生物濃度為2×10⁷-5×10⁸cell/g。