[發(fā)明專利]高效液相色譜法檢測(cè)藥物中殘留有機(jī)溶劑的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310016004.4
• 申請(qǐng)日: 2013-01-16
• 公開（公告）號(hào): CN103926334A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳禮莉;胡崇林;李雯;蒲友明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都睿智化學(xué)研究有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 上海弼興律師事務(wù)所 31283
• 代理人: 鐘華;王衛(wèi)彬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高效液相色譜法檢測(cè)藥物中殘留有機(jī)溶劑的方法。

背景技術(shù)

N,N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethyl?formamide,DMF）是一種無(wú)色高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑，其沸點(diǎn)為153℃。N,N-二甲基甲酰胺（DMF）能與水、乙醇、乙醚、醛、酮、酯、鹵代烴和芳烴等混溶。其結(jié)構(gòu)式為：

其分子式為：C₃H₇NO，分子量：73.10

N，N-二甲基乙酰胺（N,N-Dimethylacetamide，DMAC）是一種無(wú)色透明有機(jī)溶劑，其沸點(diǎn)為166℃。能與水、醇、醚、酯、苯、三氯甲烷和芳香化合物等有機(jī)溶劑任意混合。其結(jié)構(gòu)式為：

其分子式為：C₄H₉NO，分子量：87.12

N-甲基吡咯烷酮（N-Methyl-2-Pyrrolidone，NMP）是一種無(wú)色透明油狀液體，微有胺的氣味，其沸點(diǎn)為203℃。能與水、醇、醚、酯、酮、鹵代烴、芳烴和蓖麻油互溶。揮發(fā)度低，熱穩(wěn)定性、化學(xué)穩(wěn)定性均佳，能隨水蒸氣揮發(fā)。有吸濕性。對(duì)光敏感。其結(jié)構(gòu)式為：

其分子式為：C₅H₉NO，分子量：99.13

在藥物合成過程中，DMF常常作為反應(yīng)試劑或重結(jié)晶試劑；DMAC在醫(yī)藥和農(nóng)藥上大量用來(lái)合成抗菌素和農(nóng)藥殺蟲劑；NMP是一種極性的非質(zhì)子傳遞溶劑，廣泛用于農(nóng)藥、醫(yī)藥和清潔劑等方面。在各國(guó)藥典中藥物中殘留的DMF，DMAC和NMP均屬于二類溶劑，是限制使用的，其殘留限度分別是0.088％，0.109％和0.053％。

目前，藥物中殘留溶劑檢測(cè)方法主要是頂空-氣相色譜法。由于DMF，DMAC和NMP沸點(diǎn)高（分別是153℃，166℃和203℃），法規(guī)要求其殘留限度低（分別是0.088％（880ppm），0.109%（1090ppm）和0.053％（530ppm）），用頂空氣相色譜法常不能達(dá)到其檢測(cè)靈敏度。因此，藥典建議采用直接進(jìn)樣-氣相色譜法檢測(cè)這種高沸點(diǎn)溶劑DMF，DMAC和NMP，增大進(jìn)樣口溫度，從而更好地氣化DMF，DMAC和NMP，達(dá)到其檢測(cè)靈敏度。但是，在實(shí)際操作中，直接進(jìn)樣-氣相色譜法中，水相直接進(jìn)樣會(huì)對(duì)氣相色譜儀及色譜柱造成不同程度的損害，對(duì)于水溶性藥物，尤其是只能溶于水的藥物，是不能采用直接進(jìn)樣-氣相色譜法來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，故水溶性藥物中殘留DMF，DMAC和NMP的檢測(cè)成為難題。該現(xiàn)象亟待解決。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)中水溶性藥物中殘留N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的檢測(cè)難度大，且可操作性不強(qiáng)的缺陷，提供一種利用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)藥物中殘留有機(jī)溶劑的方法，該方法能夠精確檢測(cè)水溶性藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP），方便快捷，靈敏度高，可檢測(cè)低濃度樣品，且準(zhǔn)確度高。

高效液相色譜法（HPLC）是色譜法的重要分支，是以液體（不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等）為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器（最常用的是紫外檢測(cè)器）進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。

現(xiàn)有技術(shù)中，沒有用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行水溶性藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）檢測(cè)的方法。本發(fā)明的發(fā)明人，根據(jù)高效液相色譜法的上述性質(zhì)，嘗試選擇適合的條件，進(jìn)行藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的檢測(cè)。該技術(shù)方案，填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)的空白，具有深遠(yuǎn)而重大的意義。

本發(fā)明的目的之一是，提供一種高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)藥物中殘留有機(jī)溶劑的方法；

其步驟包括：將經(jīng)過預(yù)處理的待測(cè)樣品進(jìn)行高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)，即可；其中，所述的檢測(cè)使用梯度洗脫的方法，流動(dòng)相A為緩沖鹽緩沖液，流動(dòng)相B為乙腈；所述的緩沖鹽為截止波長(zhǎng)≤210nm的緩沖鹽；

所述的梯度洗脫的條件為：以流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為（90：10）~（98：2）洗脫5分鐘；之后以流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為（20：80）~（10：90）洗脫，或線性洗脫至流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為（20：80）~（10：90）；洗脫至雜質(zhì)除去，即可。