[發明專利]高鹽篩選耐鹽堿月季植株的方法

無效

• 申請號: 201310008730.1
• 申請日: 2013-01-10
• 公開（公告）號: CN103004610A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 王昱蓉;季靜
• 申請（專利權）人: 王昱蓉;季靜
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

1.高鹽篩選耐鹽堿月季植株的方法，其特征在于它包括的步驟：?

1）月季外植體栽培基質的配制

蛭石、珍珠巖和營養土以5-10：2：1的質量比例配制基質，并在基質上層壓0.5-1厘米的河沙，用0.2-?0.5%高錳酸鉀消毒后，再用0.1-?0.3%的生根液對基質進行噴灑；?

2）月季外植體的制備

選取維管束較粗的木質纖維化月季枝條，剪成8-15cm的莖段，每個莖段留2-3片葉子，將月季莖段的形態學下端浸入1-3%?的生根液中浸泡0.5-1小時，扦插入配制的基質中，并用稀釋10倍的液體培養基A進行澆灌，培養兩周；

3）月季芽組織的誘導和高鹽篩選

扦插兩周后，月季外植體開始有新的芽長出，依次用含不同濃度NaCl的芽組織誘導與生根培養基B進行篩選；?

第一～二周，NaCl濃度為6.0‰，培養溫度18～26℃，光照12h/d，光照度2000～4000Lx；

第三～四周，NaCl濃度為7.0‰，培養溫度18～26℃，光照12h/d，光照度2000～4000Lx；

第五～六周，NaCl濃度為8.0‰，培養溫度18～26℃，光照12h/d，光照度2000～4000Lx；

4）篩選后成活月季的移栽

選取正常生長的月季植株種植于鹽堿花盆，正常管理，成活后移栽到鹽堿地，鹽堿地pH值8.7-9.0；總鹽量為0.5％-0.85％，并澆灌稀釋100倍的培養基C，實施正常的管理；

5）按通用的脯氨酸含量的檢測方法，對耐鹽堿月季的抗性分子的檢測

?繪制脯氨酸的標準曲線，曲線方程y=27.015x?+?1.7929，R²=0.9936；

從篩選的耐鹽堿月季中提取得到脯氨酸的提取液，測定其中的脯氨酸的含量，從標準曲線上查出樣品測定液中脯氨酸的含量，按下公式計算樣品中脯氨酸含量：

脯氨酸含量（μg·g^－1Fw）=[?X?×?提取液總量（ml）]/?[樣品鮮重（g）×?測定時提取液用量（ml）]

公式中：X?－從標準曲線中查得的脯氨酸含量（μg）；

6）運輸、栽培與移栽：?

將批量耐鹽堿月季苗按正常條件保溫、保濕、避光包裝好，直接運輸格爾木室內大棚栽培，將成活月季移栽到室外，正常管理。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述的液體培養基A的配方為：MS+?0.4mg/L?6-BA+?0.8?mg/L?NAA。

3.?根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟2）所述的培養條件：培養溫度18～26℃，光照12h/d，光照度2000～4000Lx。

4.?根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述的培養基B的配方為：?MS+1?mg/L?6-BA+NaCl。

5.?根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述的培養基C的配方為：MS+?0.4mg/L?6-BA+0.8?mg/L?NAA+1mg/L?IBA。

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