[發(fā)明專利]酵母β-D-葡聚糖的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310003610.2
• 申請日: 2013-01-06
• 公開（公告）號: CN103044572A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王強(qiáng);劉紅芝;劉麗;胡暉;高潔
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種酵母β-D-葡聚糖的制備方法。

背景技術(shù)

β-D-葡聚糖是一類廣泛存在于細(xì)菌、真菌、藻類和植物體內(nèi)的多糖，它的主要來源之一即為釀酒酵母（Saccharomyces?cerevisisae）。酵母β-D-葡聚糖占酵母細(xì)胞壁的50%左右，其分子內(nèi)多羥基相互作用形成致密的三股螺旋結(jié)構(gòu)，直徑一般在20~80μm。酵母β-D-葡聚糖具有增強(qiáng)免疫力、抗消炎、抗菌、抗感染、抗病毒、抗癌、降低膽固醇、防輻射、治愈傷口等諸多生理功能，是一種良好的生物效應(yīng)調(diào)節(jié)劑[BRMs]。我國有著豐富的釀酒酵母資源，如廢啤酒酵母。近年來，我國啤酒工業(yè)發(fā)展迅猛，年產(chǎn)量已經(jīng)超過4000萬噸，而啤酒廢酵母作為啤酒工業(yè)主要的副產(chǎn)物之一，年產(chǎn)量也已達(dá)40~70萬噸，但是目前釀酒酵母的開發(fā)利用率極低，不僅浪費(fèi)資源，還容易污染環(huán)境，所以亟需利用現(xiàn)代的科學(xué)技術(shù)加強(qiáng)對釀酒酵母資源的綜合利用，這將具有極大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

現(xiàn)有釀酒酵母β-D-葡聚糖的制備方法主要有酸法、堿法、酸堿法、酶法、超聲波法和結(jié)合法等方法。雖然制備釀酒酵母β-D-葡聚糖的方法眾多，但是大多產(chǎn)業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)受限。目前，我國廣泛用于工業(yè)化生產(chǎn)釀酒酵母β-葡聚糖的方法主要為堿法，雖然堿法制備出的產(chǎn)品純度高，但是堿法會破壞β-D-葡聚糖的結(jié)構(gòu)而使得率低，且大量使用堿會污染環(huán)境和損害人體健康。采用非強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等溫和條件制備適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)高純度酵母β-D-葡聚糖且的方法尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種酵母β-D-葡聚糖的制備方法，該方法采用自溶、高溫抽提、高壓微射流均質(zhì)和酶解結(jié)合由釀酒酵母制備β-D-葡聚糖，制備條件溫和，不采用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和有機(jī)溶劑等對環(huán)境有害的試劑，且可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。

本發(fā)明所提供的一種酵母β-D-葡聚糖的制備方法，包括如下步驟：

（1）將釀酒酵母加入至水中得到懸浮液，記為懸浮液a；向所述懸浮液a中加入NaCl，然后進(jìn)行誘導(dǎo)自溶，再經(jīng)滅酶活后進(jìn)行離心，得到沉淀，記為沉淀a；

（2）向所述沉淀a中加入磷酸鹽緩沖液a得到懸浮液，記為懸浮液b，經(jīng)抽提后進(jìn)行離心處理，得到沉淀，記為沉淀b；

（3）向所述沉淀b中加入水得到懸浮液，記為懸浮液c；將所述懸浮液c進(jìn)行微射流均質(zhì)處理，然后經(jīng)離心得到沉淀，記為沉淀c；

（4）向所述沉淀c中加入磷酸鹽緩沖液b得到懸浮液，記為懸浮液d；向所述懸浮液d中加入酶進(jìn)行酶解，然后進(jìn)行滅酶活處理；

（5）對經(jīng)步驟（4）處理后的酶解液進(jìn)行微射流均質(zhì)處理，然后經(jīng)離心得到沉淀，記為沉淀d；

（6）所述沉淀d依次經(jīng)脫水和干燥后即得到所述酵母β-D-葡聚糖。

上述的制備方法中，步驟（1）中，所述懸浮液a中所述釀酒酵母與所述水的體積份數(shù)比可為1：2~20，具體可為1：5~20、1：5或1：20；

所述懸浮液a中所述NaCl的質(zhì)量百分含量可為2%~5%，具體可為3%；

所述誘導(dǎo)自溶的溫度可為45℃~60℃，時間可為10~30小時，pH值可為4.5~5.5，具體可在pH值為5.0、溫度為55℃下誘導(dǎo)自溶24小時；

所述滅酶活的溫度可為85℃~100℃，具體可為85℃或100℃，時間可為10~20min，具體可為10~15min、10min或15min；

所述方法還包括用水洗滌所述沉淀a的步驟。

上述的制備方法中，步驟（2）中，所述懸浮液b中所述沉淀a與所述磷酸鹽緩沖液a的質(zhì)量份數(shù)比可為1：3~20，具體可為1：5~20、1：5或1：20；

所述抽提的溫度可為80℃~120℃，時間可為2~7小時，如在95℃的條件下抽提4小時；

所述方法還包括用水洗滌所述沉淀b的步驟；

所述磷酸鹽緩沖液a的濃度可為0.02mol/L，pH值可為7.5。

上述的制備方法中，步驟（3）中，所述懸浮液c中所述沉淀b與所述水的質(zhì)量份數(shù)比可為1：3~20，具體可為1：4~20、1：4或1：20；

所述微射流均質(zhì)處理的壓力可為70~250MPa，具體可為200MPa，處理流量可為25~200mL/min，具體可為200mL/min；

所述微射流均質(zhì)處理的處理次數(shù)可為1~8次；

所述方法還包括用水洗滌所述沉淀c的步驟。

上述的制備方法中，步驟（4）中，所述懸浮液d中所述沉淀c與所述磷酸鹽緩沖液b的質(zhì)量份數(shù)比可為1：3~20，具體可為1：3或1：20；