[發(fā)明專利]丹酚酸B作為兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑在帕金森病治療中的應(yīng)用

無效

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• 申請日: 2013-01-04
• 公開（公告）號: CN103054847A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王廣基;郝海平;亓蕖;郝琨
• 申請（專利權(quán)）人: 中國藥科大學(xué)
• 主分類號: A61K31/343
• 分類號: A61K31/343;A61P25/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及丹酚酸B作為兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑在帕金森病治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(Catechol-O-methyltransferase，COMT)是生物體內(nèi)一種重要的II相代謝酶，參與將含有兒茶酚結(jié)構(gòu)的物質(zhì)進行0-甲基化代謝。其底物有內(nèi)源性物質(zhì)如腎上腺素、去甲腎上腺素等兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)和外源性物質(zhì)(藥物)如茶多酚、左旋多巴等。因此，調(diào)節(jié)COMT的功能可能會影響這些物質(zhì)在生物體內(nèi)的代謝過程，從而產(chǎn)生一系列生理、藥理效應(yīng)。。

帕金森病是一種慢性神經(jīng)退行性疾病，患者腦內(nèi)黑質(zhì)紋狀體中多巴胺減少，出現(xiàn)肌肉震顫、強直等一系列癥狀。目前對于帕金森病尚沒有根治方法，只能通過服用藥物來減緩癥狀。臨床上常用的L-DOPA是多巴胺的前體藥物，可以透過血腦屏障脫羧產(chǎn)生多巴胺進入腦內(nèi)從而達到治療效果。由于L-DOPA在外周被大量代謝(脫羧)導(dǎo)致其入腦量不到給藥量的10％，臨床上采用都是外周脫羧酶抑制劑如卡比多巴(Carbidopa)或芐絲肼與L-DOPA聯(lián)合用藥以達到增加其中樞濃度的作用。然而，即使在L-DOPA與Carbidopa合用后，仍然只有不到10％的L-DOPA可以入腦，原因是L-DOPA在外周的脫羧反應(yīng)被抑制后，大約有90％的L-DOPA被COMT代謝生成3-氧甲基左旋多巴(3-OMD)。因此，將L-DOPA與脫羧酶抑制劑及COMT抑制劑(如托卡朋，恩他卡朋)合用是目前臨床上的建議用法。然而，托卡朋有很強的肝毒性，恩他卡朋的毒性雖小但效應(yīng)不夠理想，二者在臨床上的應(yīng)用都受到各種限制，所以需要尋找新的低毒、有效的COMT抑制劑以改善左旋多巴(L-DOPA)對帕金森病的治療效果。

丹酚酸B(SAB)為中藥丹參的中最主要的水溶性成分之一，具有抗氧化、抗血小板聚集以及抗癌等多種效應(yīng)。其結(jié)構(gòu)式為：

SAB的臨床前藥代動力學(xué)的研究表明，SAB在體內(nèi)快速被代謝為甲基化代謝產(chǎn)物并通過膽汁排泄，提示COMT在SAB的代謝中發(fā)揮了重要的作用。我們的早期研究也發(fā)現(xiàn)在甲基供體S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的存在下，通過體外溫孵，SAB會被代謝生成甲基化代謝產(chǎn)物，而且有明顯的底物抑制現(xiàn)象。因此，我們推測SAB可能會有效的抑制COMT其它底物如L-DOPA的代謝。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供SAB的一種新的醫(yī)藥用途，即可通過抑制COMT介導(dǎo)的L-DOPA的甲基化代謝從而改善L-DOPA治療帕金森病的效果。首先我們制備了大鼠的肝胞漿COMT，優(yōu)化了L-DOPA的體外溫孵條件以保證代謝物3-OMD的生成與溫孵時間和酶濃度呈線性。通過時間依賴性曲線發(fā)現(xiàn)3-OMD的線性時間范圍為10-45min，同理通過酶濃度依賴曲線可以得出線性酶濃度范圍為0.2-1mg/ml，所以最終選取酶濃度為0.5mg/ml，溫孵時間為30min。然后考察了L-DOPA的體外甲基化代謝情況，得到酶動力學(xué)曲線，符合經(jīng)典的酶動力學(xué)，Km值為16μM，在溫孵體系中加入了一系列濃度的SAB后，發(fā)現(xiàn)SAB可以濃度依賴的抑制L-DOPA的甲基化代謝，IC50為1.84μM。對于體內(nèi)研究，同時給予SD大鼠L-DOPA/Carbidopa和SAB后，與單獨給予L-DOPA/Caibidopa相比，血漿和紋狀體中的3-OMD的濃度都明顯下降(p＜0.05)，說明丹酚酸B的確可以抑制L-DOPA在體內(nèi)的甲基化代謝。

附圖說明

圖1：A，L-DOPA體外溫孵的時間依賴性曲線；B，L-DOPA體外溫孵的酶濃度依賴性曲線。

圖2：L-DOPA的酶動力學(xué)曲線。

圖3：SAB對L-DOPA體外甲基化代謝的抑制曲線。

圖4：SAB對L-DOPA體內(nèi)甲基化代謝的抑制作用。A，SAB對血漿中3-OMD濃度的影響；B，SAB對腦部紋狀體部位的3-OMD濃度的影響。

具體實施方式

實施例1.大鼠肝胞漿COMT酶的制備

實驗材料：SD大鼠，SPF級別，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。