[發明專利]用于通過添加交替電子受體改善微生物中的產品收率和產量的方法

有效

• 申請號: 201280025218.1
• 申請日: 2012-04-05
• 公開（公告）號: CN103649321B
• 公開（公告）日: 2019-07-16
• 發明（設計）人: A·阿吉羅斯;W·R·西勒斯;T·巴雷特;N·凱阿扎;A·J·肖四世
• 申請（專利權）人: 拉勒曼德匈牙利流動性管理有限責任公司
• 主分類號: C12P7/06
• 分類號: C12P7/06;C12P7/10;C12N1/18;C12P7/08;C12N9/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李程達

1.一種重組微生物，其包含：

(a)一種或多種用于產生甘油和/或調節甘油合成的天然酶的缺失，所述一種或多種酶由gpd1、gpd2、gpp1、gpp2或fps1多核苷酸編碼；

(b)用于將丙酮酸轉化為乙酰-CoA和甲酸的異源丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)，和用于將乙酰-CoA轉化為乙醇的異源和/或天然的乙醛脫氫酶、醇脫氫酶或雙功能乙醛/醇脫氫酶，其中所述異源丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)，和異源和/或天然的乙醛脫氫酶、醇脫氫酶或雙功能乙醛/醇脫氫酶能在工程化代謝途徑中將碳水化合物源轉化成乙醇；

(c)一種或多種由fdhl多核苷酸和/或fdh2多核苷酸編碼的酶的缺失；和

(d)一種或多種異源多核苷酸，其編碼糖解酶，其中所述糖解酶是葡糖淀粉酶。

2.權利要求1的重組微生物，其中所述重組微生物產生比不具有所述一種或多種用于產生甘油和/或調節甘油合成的天然酶的缺失的對照重組微生物更少的甘油。

3.權利要求1的重組微生物，其中所述碳水化合物源是生物質。

4.權利要求1的重組微生物，其還包含有效地連接于gpd2啟動子多核苷酸的天然或異源gpd1多核苷酸，或有效地連接于gpd1啟動子多核苷酸的天然或異源gpd2多核苷酸。

5.權利要求1的重組微生物，其中所述微生物產生乙醇。

6.權利要求5的重組微生物，其中所述微生物產生甲酸。

7.權利要求6的重組微生物，其中所述微生物選自釀酒酵母、乳酸克魯維酵母、馬克思克魯維酵母、巴斯德畢赤酵母、解脂耶羅維亞酵母、多形漢森酵母、紅發夫酵母、實用假絲酵母、Arxula adeninivorans、樹干畢赤酵母、漢遜德巴利酵母、多型德巴利酵母、粟酒裂殖酵母、白色念珠菌和西方許旺酵母。

8.權利要求7的重組微生物，其中所述微生物是釀酒酵母。

9.權利要求1的重組微生物，其中所述PFL具有原核或真核生物來源。

10.權利要求9的重組微生物，其中所述PFL來自雙歧桿菌屬、埃希氏菌屬、好熱厭氧桿菌屬、梭菌屬、鏈球菌屬、乳桿菌屬、衣藻屬、單鞭毛菌、新麗鞭毛菌屬或芽孢桿菌屬中的一種或多種。

11.權利要求9的重組微生物，其中所述PFL來自地衣芽胞桿菌、嗜熱鏈球菌、胚芽乳桿菌、干酪乳桿菌、青春雙岐桿菌、解纖維素梭菌、大腸桿菌、萊茵衣藻PflA、單鞭毛菌屬E2或新麗鞭毛菌的一種或多種。

12.權利要求1的重組微生物，其中所述PFL來自青春雙岐桿菌。

13.權利要求1的重組微生物，其中所述乙醛脫氫酶、醇脫氫酶或雙功能乙醛/醇脫氫酶具有原核或真核生物來源。

14.權利要求1的重組微生物，其中所述乙醛脫氫酶來自C.phytofermentans。

15.權利要求1的重組微生物，其中所述雙功能乙醛/醇脫氫酶來自埃希氏菌屬、梭菌屬、衣藻屬、單鞭毛菌屬或雙歧桿菌屬。

16.權利要求1的重組微生物，其中所述雙功能乙醛/醇脫氫酶來自大腸桿菌、Clostridium phytofermentans、萊茵衣藻、單鞭毛菌屬E2或青春雙岐桿菌。

17.權利要求16的重組微生物，其中所述雙功能乙醛/醇脫氫酶來自青春雙岐桿菌或單鞭毛菌屬E2。