[發(fā)明專利]用于監(jiān)測抗凝療法的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280021851.3
• 申請日: 2012-03-08
• 公開（公告）號(hào): CN103534595A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: P·T·昂達(dá)森;B·R·古德穆德斯多特
• 申請（專利權(quán)）人: 費(fèi)克斯診斷公司
• 主分類號(hào): G01N33/86
• 分類號(hào): G01N33/86
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 崔錫強(qiáng)

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)診斷和藥物監(jiān)測領(lǐng)域，特別地，屬于測定采用藥物化合物的抗凝療法的患者中血液凝固的領(lǐng)域。

技術(shù)背景和現(xiàn)有技術(shù)

血液凝固是在血液循環(huán)系統(tǒng)的任何部分受損時(shí)防止持續(xù)失血的機(jī)制。它涉及形成血液物質(zhì)的半固體塊，其起到填充血管創(chuàng)口的作用。該系統(tǒng)包含必須保持平衡的血液和血管壁中的系列相互作用成分；失活的系統(tǒng)導(dǎo)致嚴(yán)重和致命性的出血風(fēng)險(xiǎn)，而凝血系統(tǒng)的過度活性導(dǎo)致循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)血塊形成風(fēng)險(xiǎn)(血栓形成和血栓栓塞)、阻塞動(dòng)脈與因組織壞死(細(xì)胞死亡)導(dǎo)致的潛在致命性后果。

抗凝藥或“血液稀釋劑”是最頻繁施用的藥物類型，且在該類型內(nèi)，維生素K拮抗劑(VKA，香豆素類)直到最近才成為唯一可利用的口服藥劑。由于患者體內(nèi)凝血系統(tǒng)的巧妙平衡和患者對療法的敏感性和響應(yīng)性非常大的改變，所以必須謹(jǐn)慎地調(diào)整和持續(xù)監(jiān)測VKA劑量，因?yàn)榛颊唔憫?yīng)和適合的劑量頻繁地隨時(shí)間改變。據(jù)估計(jì)全世界每年進(jìn)行8億次檢驗(yàn)以監(jiān)測使用VKA的患者的凝血情況。

凝血系統(tǒng)包含互連的酶原、酶和輔因子的復(fù)雜系統(tǒng)，其作用在人體內(nèi)活化血小板和內(nèi)皮細(xì)胞表面上和破損的血管內(nèi)發(fā)揮。當(dāng)該系統(tǒng)活化時(shí)，通常是在血管創(chuàng)口中，最終的結(jié)果是形成包含不溶性纖維蛋白網(wǎng)孔的血塊。在體內(nèi)，凝固過程在活化的血小板和內(nèi)皮細(xì)胞表面上謹(jǐn)慎地得到控制，但在測試的實(shí)驗(yàn)室中，血小板表面通常被適合的磷脂類取代。酶原、酶和輔因子傳統(tǒng)上稱作凝血因子(F)，它們中的大部分在肝內(nèi)形成。

維生素K依賴性凝血因子和維生素K拮抗劑：4種凝血因即在肝內(nèi)形成的FII、FVII、FIX和FX是無活性的，除非在合成后，它們進(jìn)一步通過肝內(nèi)的維生素K依賴性酶過程被羧化。在維生素K缺乏的患者或用維生素K拮抗劑(VKA)治療的患者中，羧化的維生素K依賴性(VKD)因子的量減少，且由此相關(guān)患者血液凝固性(凝固能力)降低。除非VKA的作用得到控制，否則它可能導(dǎo)致嚴(yán)重且甚至是致命性的內(nèi)出血。但是，通過以受控方式降低VKD因子水平，可以預(yù)防血管內(nèi)的異常凝血(血栓形成)，同時(shí)將出血的風(fēng)險(xiǎn)降低到最低限度。因此，必須使用適合的凝固試驗(yàn)監(jiān)測VKA的作用?；谠囼?yàn)結(jié)果，然后可以調(diào)整劑量，使抗血栓形成作用最大化，同時(shí)將抗凝過度導(dǎo)致的異常出血風(fēng)險(xiǎn)降低到最低限度。

基于測定凝血酶原時(shí)間(PT)監(jiān)測VKA患者中的凝血活性已經(jīng)超過60年了，為起始Quick?PT(PT)(Quick,A.,J?Bio?Chem1935(109)：p.73-4)或其改進(jìn)、Owren's?PT(也稱作PP,P&P-檢驗(yàn)或凝血酶原復(fù)合物試驗(yàn))(Owren和Aas.Scand?J?Clin?Lab?Invest,1951.3(3)：p.201-8.)。PT檢驗(yàn)測定已經(jīng)耗盡了鈣的血漿樣品中4種維生素K依賴性凝血因子中的3種(即FII、FVII和FX)和纖維蛋白原(因子I)和因子V的凝血活性，通過添加凝固試劑(促凝血酶原激酶，組織因子)和鈣、然后測定血液凝固所需的時(shí)間來進(jìn)行。后面的檢驗(yàn)(P&P)是PT的改進(jìn)，其中將吸收的血漿(總體缺乏維生素K依賴性因子)混入測試血漿，校正因子V或纖維蛋白原的任何可能的缺乏并且保留僅對因子II、VII和X敏感的P&P檢驗(yàn)。因此，PT檢驗(yàn)也對非維生素K依賴性的因子V和纖維蛋白原的缺乏敏感，且如果缺乏，則可能使服用VKA的患者中的結(jié)果混淆。然而，使用兩種檢驗(yàn)，測定的凝血時(shí)間對該檢驗(yàn)所測定的3種維生素K依賴性因子即FII、FVII和FX的任一種的減少等同地敏感。通過這些檢驗(yàn)無法測定FIX凝固活性。實(shí)際上推定使用基于PT的檢驗(yàn)得到的凝血時(shí)間直接反映出除了啟動(dòng)VKA療法過程中之外的VKA在患者中的抗血栓形成作用。然而，不一定情況屬實(shí)。

實(shí)際測定的對正常個(gè)體測定的凝血時(shí)間將根據(jù)所應(yīng)用的方法且還有分析系統(tǒng)和所用的具體試劑的不同而改變。所用的不同的凝固試劑且甚至不同批次的制造商的組織因子(促凝血酶原激酶)和蛋白質(zhì)都將導(dǎo)致使用PT或P&P得到的凝血時(shí)間的變異性。因此，設(shè)計(jì)了用于校準(zhǔn)方法的方案。每個(gè)制造商都指定了所提供的組織因子的ISI值(國際敏感指數(shù))(參見WHO?Guidelines?for?Thromboplastins?and?Plasma?Used?to?Control?Anticoagulant?Therapy,TRS,No889,附錄3.)。ISI值表示特定批次的組織因子與國際標(biāo)準(zhǔn)的樣品比較如何。ISI通常是1.0－2.0。由此可以計(jì)算“國際校準(zhǔn)的比”值(INR)，其為患者的凝血酶原時(shí)間與平均正常群體PT之比，然后使得上述之比值取分析系統(tǒng)的ISI值的次冪。INR值由此可以用如下等式描述：