[實用新型]人催產素酶聯免疫吸附測定試劑盒有效
| 申請號: | 201220616282.4 | 申請日: | 2012-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN202994796U | 公開(公告)日: | 2013-06-12 |
| 發明(設計)人: | 萬定一;何峰容;朱馨蕾;楊娟;汪景;謝正紅;李慶;叢旭霞;劉曉樂 | 申請(專利權)人: | 武漢優爾生科技股份有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/544 | 分類號: | G01N33/544;G01N33/74 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 430056 湖北省武漢*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 催產素 免疫 吸附 測定 試劑盒 | ||
技術領域
本實用新型屬于涉及生物技術領域,具體而言,涉及人催產素Oxytocin(OT)酶聯免疫吸附測定(ELISA)試劑盒。
背景技術
催產素,Oxytocin(OT),又稱縮宮素,是一種哺乳動物激素。由9個氨基酸構成的特殊結構的環狀肽類激素,分子量為1007.19,在大腦下視丘“室旁核”與“視上核(supraoptic?nucleus)”神經元所自然分泌,經下視丘腦下垂體路徑神經纖維送到后葉分泌。
催產素在雌性哺乳動物生產時大量釋放,擴張子宮頸和收縮子宮,促進分娩。分娩后催產素也會刺激乳頭,促進乳汁產生。最近的研究已經開始探討催產素對于各種行為的影響,包括性高潮、社會認同、夫妻或情侶間的成對結合、焦慮,和產婦的行為等。出于這個原因,它有時被稱為“愛情激素”。催產素有助于減輕壓力及緩解疼痛。無法分泌催產素和無法感到同情和反社會,精神病,自戀和一般的操控個性有關。
目前國際已報道的催產素定量測定方法主要有高效液相色譜法、放射免疫測定法和酶聯免疫吸附測定法。
高效液相色譜法(HPLC)具有靈敏度高、準確性和重復性好等優勢,但需要昂貴的儀器設備,而且檢測過程繁瑣、樣本前處理的技術要求很高,難于操作。檢測人員需要具備專業的檢測技能和豐富的實驗經驗。
放射免疫分析法(RIA)是一種應用放射性同位素的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合而成的體外微量分析方法。雖然該技術特異性較高,靈敏度也較高,但其局限性也很顯著,主要有以下幾點:
1)原料來源:必須使用放射性核素,需要防護和防止污染;
2)穩定性差:放射性同位素易衰減,標記抗原有效使用時間短;
3)難以實現操作和測量的自動化。
酶聯免疫吸附測定(ELISA)檢測技術是在RIA基本理論的基礎上發展起來的一種非放射性標記免疫分析技術。利用抗原-抗體之間特異性的免疫反應識別生物液體中的靶分子,并利用酶-底物的顯色反應定量的反應待測樣本中靶分子的含量。由于其特異性強、靈敏度、操作簡便及不需大型儀器等優點,現廣泛用于生物樣本的定量檢測實驗中。酶聯免疫吸附測定試劑盒中的關鍵因素是獲得高特異性、高親和力的抗體,但由于人催產素是小分子多肽物質,免疫原性較弱,通過傳統的免疫方法不易產生特異性的抗體,而本專利利用偶聯載體來增加其免疫原性,獲得高質量的抗體。本專利從酶聯免疫吸附測定試劑盒制備的源頭入手,將人催產素與BSA偶聯,通過利用新技術提高偶聯效率,制備穩定的OT-GA-BSA(催產素-戊二醛-牛血清白蛋白),再使用免疫技術制備特異性高親和力強的抗體,為試劑盒的制備提供高品質原材料。同法制得抗原OT-GA-OVA(催產素-戊二醛-雞卵白蛋白)。
因此,有必要選用一種快速、簡便能夠定量且靈敏度、準確度和特異性高的方法來進行人催產素的檢測。
實用新型內容
本實用新型目的是人催產素酶聯免疫吸附測定試劑盒,其操作簡便,成本低,穩定性好,可以滿足普通實驗室的要求。為了實現本實用新型的目的,擬采用如下技術方案:
本實用新型一方面涉及一種人催產素酶聯免疫吸附測定試劑盒,包括酶標板,所述酶標板包括固相載體和包被層,其特征在于:所述固相載體上設置有多個微孔,所述包被層附著在所述固相載體的微孔表面,所述包被層是由人催產素抗體和牛血清白蛋白依次涂布在所述固相載體的微孔表面上形成的復合層。
在本實用新型的一個優選實施方式中,所述的多個微孔是指96個微孔。
在本實用新型的一個優選實施方式中,所述的固相載體是聚苯乙烯試劑板。
本專利通過高效的偶聯方法的得到穩定性好的OT-GA-BSA,并通過免疫動物得到特異性高及親和力強的抗體,用來制備人催產素免疫免疫吸附測定試劑盒。通過于與HPLC法的比較,其精密度、回收率、準確性和批量檢測樣本等方面均優于HPLC法。ELISA法比HPLC法樣品前處理簡單得多,特異性好,無需純化濃縮。另外,ELISA法比HPLC法操作時間短,一次可處理大量樣品,節約了大量的人力、物力,提高了工作效率。而且,ELISA法比HPLC法投資小,儀器的使用不需要專業培訓技術人員,更適合基層單位使用。
附圖說明
圖1為本實用新型一具體實施例酶標板結構示意圖。
1固相載體,2微孔,3包被層。
具體實施方式
下面結合附圖和具體實施例對本實用新型作進一步說明,以使本領域的技術人員可以更好的理解本實用新型并能予以實施,但所舉實施例不作為對本實用新型的限定。
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