[實用新型]一種毒物激活能力指標評估試劑盒

有效

• 申請號: 201220200349.6
• 申請日: 2012-05-07
• 公開（公告）號: CN202576422U
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 傅詠南;王校;毛丹丹
• 申請（專利權）人: 上海中優醫藥高科技有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/68
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩;王婧

技術領域

本實用新型提供了一種毒物激活能力指標評估試劑盒，屬于分子生物學技術領域。

背景技術

外源性化學物質包括治療性藥物、環境或職業密切接觸的物質等。機體對外來化合物的代謝過程包括I相反應和II相反應，I相反應主要對外來化合物進行生物轉化，如：氧化、還原、水解反應。II相反應則對I相反應代謝活化后所產生的中間代謝產物與體內的化合物進行結合反應，如：谷胱甘肽結合、葡糖醛酸化等反應。一般講外來化合物經機體代謝后毒性降低或喪失，但亦有少數外來化合物經機體代謝后毒性增高，對人體產生危害。

一種毒物是否表現出對人體的毒性，不僅取決于該毒物固有的效能、與作用部位結合的特異性，還取決于機體對毒物的處置能力。研究發現95％以上的致癌物進人體內需經代謝途徑激活后才能與DNA等生物大分子結合，引起早期生物學反應，最終導致癌變。在這種激活反應過程中涉及細胞色素P450，CYP450是體內重要的激活酶(又稱I相酶)，所以致癌物能否引起靶細胞的癌變很大程度取決于這類酶的活性及彼此的平衡。其中依賴于細胞色素P450的單加氧酶系中的一些基因位點，如細胞色素P450?1A1(CYP1A1)、細胞色素P450?2E1(CYP2E1)、細胞色素P450?2A13(CYP2A13)，可作為評估個體毒物激活能力的標記物，在疾病發生之前，從遺傳角度提示受檢者毒物代謝的發生風險，提高受檢者的自我保健意識。

發明內容

本實用新型的目的是提供一種使用方便、成本低的毒物激活能力指標評估試劑盒。

為了達到上述目的，本實用新型提供了一種毒物激活能力指標評估試劑盒，包括包裝盒體，其特征在于，所述的包裝盒體內設有口腔拭子，三個含有熒光定量PCR反應液的試管，樣本保存管、含陽性對照品的試管以及含陰性對照品的試管。

與現有技術相比，本實用新型的優點是：將樣本采集以及評估個體毒物激活能力的SNP位點檢測試劑整合在一個試劑盒內，能夠快速評估個體毒物激活能力的體征指標，使用更方便快捷，且成本更低。

本實用新型基于熒光定量PCR技術，應用具有分辨率更高、雜交特異性更強、重現性好等特點的Taqman-MGB探針，不僅檢測速度快，全部反應在封閉的反應管中完成，有效避免了交叉污染，且自動化程度高，能夠實時監控，提供質控標準品，使結果判讀更直觀。

附圖說明

圖1為毒物激活能力指標評估試劑盒結構示意圖；

圖2為細胞色素P450?1A1(CYP1A1)rs1048943被檢測樣本的示意圖；

圖3為細胞色素P450?2E1(CYP2E1)rs2031920被檢測樣本的示意圖；

圖4為細胞色素P450?2A13(CYP2A13)rs8192789被檢測樣本的示意圖；

具體實施方式

以下結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。

實施例1

如圖1所示，為毒物激活能力指標評估試劑盒結構示意圖，所述的毒物激活能力指標評估試劑盒，包括包裝盒體1，所述的包裝盒體1內設有口腔拭子2，三個含有熒光定量PCR反應液的試管4，樣本保存管3、含陽性對照品的試管5以及含陰性對照品的試管6。

所述的毒物激活能力指標評估試劑盒的使用方法為：

步驟1.采集檢測樣品：

用口腔拭子2在被測者口腔左右兩腮分別各上下刮20次，保證采集到足量的細胞樣本，采集完畢，樣本保存于樣本保存管3中。

步驟2.采用硅膠吸附法抽提樣本的基因組DNA。

步驟3：熒光定量PCR反應

三個含有熒光定量PCR反應液的試管4中所含的熒光定量PCR反應液的成分分別包含：10×PCR反應緩沖液、dNTPs、MgCl₂溶液、Taq?DNA聚合酶及3個不同SNP位點的正反向引物、熒光探針。

其中，

細胞色素P450?1A1(CYP1A1)rs1048943檢測引物和探針為：

正向引物：5′-agcggaagtgtatcggtgag-3′

反向引物：5′-ggtcatgtccaccttcacg-3′

帶VIC熒光G型探針：tgagaccgttgccc

帶FAM熒光A型探針：agaccattgcccgct

細胞色素P450?2E1(CYP2E1)rs2031920檢測引物和探針為：

正向引物：5′-caagtgatttggctggattg-3′