[發明專利]DNA-殼聚糖復合納米顆粒、其制備及應用無效
| 申請號： | 201210576548.1 | 申請日： | 2012-12-26 |
| 公開（公告）號： | CN103893757A | 公開（公告）日： | 2014-07-02 |
| 發明（設計）人： | 萬曉春;田永帥;蔡林濤;馬軼凡 | 申請（專利權）人： | 深圳先進技術研究院 |
| 主分類號： | A61K39/39 | 分類號： | A61K39/39;A61K47/36;A61P37/02 |
| 代理公司： | 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 宋鷹武 |
| 地址： | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | dna 聚糖 復合 納米 顆粒 制備 應用 | ||
1.一種DNA-殼聚糖復合納米顆粒，為殼聚糖增溶衍生物包裹的含有AS3短發夾序列的重組質粒，所述AS3短發夾序列為通過環狀序列連接的SEQ?NO.1所示序列與其互補序列。
2.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述殼聚糖增溶衍生物為殼聚糖-聚乙烯亞胺-聚乙二醇聚合物。
3.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述環狀序列為TCAAGAG序列。
4.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述重組質粒的大小為4610bp。
5.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述納米顆粒的粒徑為35-50nm。
6.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述殼聚糖增溶衍生物與所述重組質粒的包被比例為摩爾比20:1。
7.用于制備權利要求1-6中任一項所述的納米顆粒的方法，包括以下步驟：
S1合成AS3短發夾序列，并退火；
S2將經退火的AS3短發夾序列與雙酶切線性質粒、DNA連接酶在連接緩沖液中混合，轉化感受態大腸桿菌，接種于含氨芐抗性的LB培養基，做抗性篩查，選取抗性菌落，得到重組質粒溶液；以及
S3將殼聚糖增溶衍生物溶液與重組質粒溶液混合，得到DNA-殼聚糖復合納米顆粒溶液。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟S3中殼聚糖增溶衍生物溶液的pH為5.5。
9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟S3中殼聚糖增溶衍生物溶液與重組質粒溶液在混合前，分別于65℃恒溫5分鐘。
10.權利要求1-6中任一項所述的納米顆粒作為免疫佐劑的應用。
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