[發明專利]A群輪狀病毒檢測免疫試紙及其制備方法

無效

• 申請號: 201210575637.4
• 申請日: 2012-12-26
• 公開（公告）號: CN103901198A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 萬曉春;任廣慧;金言
• 申請（專利權）人: 深圳先進技術研究院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 生啟;吳平

技術領域

本發明涉及一種A群輪狀病毒檢測免疫試紙及其制備方法。

背景技術

目前，豬輪狀病毒（Porcine?rotavirus，PoRV）屬呼腸孤病毒科輪狀病毒屬，輪狀病毒感染是引起仔豬爆發消化道機能紊亂的一種急性腸道傳染病，以嘔吐、腹瀉、脫水和酸堿平衡紊亂為特征，給養豬業帶來嚴重的危害。PoRV存在多種血清型，我國豬群中輪狀病毒的感染以A群為主，在A群PoRV中VP6蛋白是群抗原，在各毒株中高度保守。我國PoRV的診斷主要還是依賴于常規實驗室診斷，其操作過程復雜、耗時，并且需要昂貴的儀器，從而使得A群輪狀病毒的檢測較為麻煩。

發明內容

基于此，有必要提供一種檢測較為簡便的A群輪狀病毒檢測免疫試紙及其制備方法。

一種A群輪狀病毒檢測免疫試紙，包括樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和背襯，所述樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜及吸水墊粘結在背襯上，所述結合墊的兩端分別與所述樣品墊及所述硝酸纖維素膜搭接，所述硝酸纖維素膜遠離所述結合墊的一端與所述吸水墊搭接，所述硝酸纖維素膜上設有相互間隔的檢測線及質控線，所述結合墊上設有A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物，所述檢測線由A群豬輪狀病毒單克隆抗體B構成，所述質控線由羊抗鼠IgG構成。

在其中一個實施例中，所述結合墊與所述樣品墊搭接的長度為1.5mm~2.5mm。

在其中一個實施例中，所述結合墊與所述硝酸纖維素膜搭接的長度為1.5mm~2.5mm。

在其中一個實施例中，所述硝酸纖維素膜與所述吸水墊搭接的長度為1.5mm~2.5mm。

在其中一個實施例中，所述背襯的材料為聚氯乙烯。

一種A群輪狀病毒檢測免疫試紙的制備方法，包括以下步驟：

將A群豬輪狀病毒單克隆抗體A與熒光納米顆粒混合制成A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物；

將A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物包被在結合墊上；

將A群豬輪狀病毒單克隆抗體B包被在硝酸纖維素膜上形成檢測線；

將羊抗鼠IgG包被在硝酸纖維素膜上形成與所述檢測線相間隔的質控線；

將樣品墊、結合墊、包有A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物的結合墊以及具有檢測線和質控線的硝酸纖維素膜依次粘貼在背襯上得到所述A群輪狀病毒檢測免疫試紙，所述結合墊的兩端分別與所述樣品墊及所述硝酸纖維素膜搭接，所述硝酸纖維素膜遠離所述結合墊的一端與所述吸水墊搭接。

在其中一個實施例中，所述熒光納米顆粒的粒徑為50nm。

在其中一個實施例中，將得到的A群輪狀病毒檢測免疫試紙放置于兩個平板之間壓制10分鐘。

在其中一個實施例中，將得到的A群輪狀病毒檢測免疫試紙裁切成條狀。

在其中一個實施例中，所述背襯的材料為聚氯乙烯。

上述A群輪狀病毒檢測免疫試紙使用時，將樣品滴加在樣品墊上，陽性結果呈現兩條線，即質控線和檢測線，陰性結果只出現一條質控線，檢測快速簡便；A群輪狀病毒檢測免疫試紙的制備方法較為簡單。

附圖說明

圖1為一實施方式的A群輪狀病毒檢測免疫試紙的結構示意圖；

圖2為一實施方式的A群輪狀病毒檢測免疫試紙的制備方法的流程圖。

具體實施方式

為了便于理解本發明，下面將參照相關附圖對本發明進行更全面的描述。附圖中給出了本發明的首選實施例。但是，本發明可以以許多不同的形式來實現，并不限于本文所描述的實施例。相反地，提供這些實施例的目的是使對本發明的公開內容更加透徹全面。

除非另有定義，本文所使用的所有的技術和科學術語與屬于本發明的技術領域的技術人員通常理解的含義相同。本文中在本發明的說明書中所使用的術語只是為了描述具體的實施例的目的，不是旨在于限制本發明。本文所使用的術語“及／或”包括一個或多個相關的所列項目的任意的和所有的組合。

請同時參閱圖1，一實施方式的A群輪狀病毒檢測免疫試紙10包括樣品墊1、結合墊2、硝酸纖維素膜3、背襯6和吸水墊7。樣品墊1、結合墊2、硝酸纖維素膜3及吸水墊7依次粘結在背襯6上。結合墊2的兩端分別與樣品墊1及硝酸纖維素膜3搭接，硝酸纖維素膜3遠離結合墊2的一端與吸水墊7搭接。

樣品墊1是試紙條檢測時直接與樣品溶液互相接觸的部分，起到了過濾樣品溶液中的非可溶性雜質成分的作用。

結合墊2上設有A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物。A群豬輪狀病毒單克隆抗體A-熒光標記物可與目標蛋白發生抗原-抗體特異性結合。