[發明專利]白斑綜合征病毒檢測試劑盒及檢測方法

無效

• 申請號: 201210574016.4
• 申請日: 2012-12-26
• 公開（公告）號: CN103088156A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 石堅;錢冬;徐錦余
• 申請（專利權）人: 杭州三合創新科技有限公司;寧波大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

技術領域

本發明涉及一種用于檢測水產養殖中相關病毒的檢測試劑盒及檢測方法，尤其涉及檢測白斑綜合征病毒的檢測試劑盒及檢測方法。

背景技術

對蝦白斑綜合征病毒?(WSSV,?white?Spot?Syndrome?Virus)已成為養殖對蝦的主要病原，也是目前發現的基因組最大的動物病毒(基因組約290kD，雙鏈環狀)?(Yang?2001；VanHulten?2001a)。該病毒首先在臺灣發現，然后迅速蔓延到東南亞其他國家，隨后到了北美。它不僅能感染對蝦，還能感染其他淡水及海水甲殼類?，如螃蟹?、螯蝦等。養殖對蝦被感染后，3～10d內累積死亡率可達100%，給對蝦養殖業造成了巨大的損失(黃健等?1995a；VanHuten?2001a)。

WSSV是1993?年中國對蝦暴發性流行病的主要病毒病原，是國家法定報告的一類動物疫病。

目前WSSV的主要檢測手段包括：1.電鏡檢測法；2.TE染色法；3.病理切片法；4.抗體檢測法；5.核酸探針雜交法；以及6.PCR檢測法。電鏡檢測法可以直接觀察到病毒的顆粒，但是檢測過程時間長，操作復雜，準確性低；TE染色和病理切片法都是在顯微鏡下對處理過的組織樣本進行觀察，靈敏度低，人為主觀因素對檢測結果有較大影響；抗體檢測法直接檢測病毒特異蛋白，核酸探針法可以直接檢測病毒核酸，但這兩種方法靈敏度不夠理想，通常無法檢測未發生病癥的潛在病毒攜帶蝦；PCR檢測法是目前使用比較廣泛的檢測手段，但其需要專業的實驗設備和專業的操作人員，無法實現WSSV的相對快速、準確檢測，更無法實現病毒的現場快速檢測，大大限制了PCR檢測方法在生產中的推廣應用。

有鑒于此，建立簡單、快速、高靈敏的白斑綜合征病毒檢測方法，開發適于現場應用的白斑綜合征病毒檢測試劑盒就顯得更為重要和緊迫。

發明內容

鑒于上述現有技術中存在的問題，本發明目的是提供一種用于檢測白斑綜合征病毒的快速檢測方法及與其配套的檢測試劑盒，以彌補現有技術的不足，使之適用于生產現場快速、準確、高靈敏度的檢測白斑綜合征病毒。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：白斑綜合征病毒檢測試劑盒，其包括含有1至2對擴增引物的擴增反應液；擴增引物選自下組：

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優選擴增反應液還含有選自下組的增效引物作：