[發明專利]一種抗耐藥性的順鉑礦化液及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210571654.0
• 申請日: 2012-12-25
• 公開（公告）號: CN103043635A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 陳偉;肖云;劉雪瑤;陳燕紅;章嬌嬌;徐旭榮;唐睿康
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C01B21/092
• 分類號: C01B21/092;A61K33/24;A61P35/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明屬于配位化學和藥學領域，具體涉及一種抗耐藥性的順鉑礦化液及其制備方法和應用。

背景技術

腫瘤治療一直是現代醫學中難以克服的課題，順鉑藥物對于腫瘤的治療是一種重要手段，而這種方法現在遇到的難題是：隨著藥物化療過程的進行，腫瘤會體現出獲得性的抵抗，這種抵抗使腫瘤組織對于化療藥物不再敏感，產生耐藥性，最終導致化療失敗。

耐藥性產生的原因可能是如下三種：(1)細胞對于鉑類藥物的攝取量不足；(2)細胞中代謝的富含-NH₂以及-SH的小分子和蛋白能夠絡合鉑類藥物，使其無法和DNA結合發揮作用；(3)鉑類藥物和DNA形成加合物之后，修復蛋白能夠識別破壞位點，完成對DNA的修復(D.J.Stewart，Oncology/Hematology?2007，63，12-31)。

其中談論比較多的是細胞內鉑的積累，產生耐藥的細胞在細胞膜上往往表達出相對較少的Ctr1蛋白(S.Ishida，J.Lee，D.J.Thiele，I.Herskowitz，Proceedings?of?the?National?Academy?of?Sciences?2002，99，14298-14302.)，這種蛋白是鉑類藥物進入細胞的主要運輸體，該蛋白的表達減少致使耐藥腫瘤細胞對于鉑類藥物的攝取減少，從而導致細胞內較少的DNA會被鉑類藥物破壞。

為了增加細胞對于鉑類藥物的攝取量，有報道將納米技術引入這種化療過程(R.Sinha，G.J.Kim，S.Nie，D.M.Shin，Molecular?Cancer?Therapeutics2006，5，1909-1917.)，有機嵌段高分子，碳納米管，金納米晶體等都用來作為鉑類藥物的載體，用于藥物從細胞外到細胞內的傳遞。但是這些納米材料存在生物安全性的問題，它們往往在生理條件下不可降解，材料本身可能就具有破壞正常細胞的能力，進而引起較大的副作用。所以，關于鉑類藥物的修飾與改造一直在研究中，不過目前對于耐藥腫瘤有效的治療方法依然不是很多。

發明內容

本發明提供了一種抗耐藥性的順鉑礦化液及其制備方法和應用，使用該方法制得的順鉑礦化液可以提高腫瘤細胞對鉑的攝取，逆轉腫瘤細胞對于藥物的抗藥性，而且具有較小的副作用。

一種抗耐藥性的順鉑礦化液的制備方法，包括以下步驟：

(1)將順鉑加入到改進型的DMEM培養基中，在含CO₂的環境中進行取代反應，反應完成后得到取代的中間體溶液；

(2)向步驟(1)得到的取代的中間體溶液中加入含鈣無機鹽，在含CO₂的環境中進行礦化反應，反應完成后得到納米固化的中間體體系；

(3)向步驟(2)得到的納米固化的中間體體系中加入胎牛血清蛋白，得到所述的順鉑礦化液；

所述的改進型的DMEM培養基為將DMEM培養基中的CaCl₂、KCl和NaCl分別替換為Ca(NO₃)₂、KNO₃和NaNO₃后得到；

其中步驟(1)和步驟(2)中，所述的含CO₂的環境中CO₂的含量為3～7％，具體可以通過培養箱進行調節。

本發明中，所述的改進型的DMEM培養基中的氯離子被硝酸根離子代替，而所述順鉑的氯配體容易在低氯環境下離去，因此以該改進型的DMEM培養基作為組分，順鉑的氯配體會發生解離，然后被碳酸根和磷酸根取代，從而完成順鉑的修飾；再通過加入含鈣無機鹽，將鈣離子引入反應體系，在生理條件(一般為37℃，5％CO₂，pH為7.2)下鈣離子與修飾有碳酸根或磷酸根的鉑體系發生作用，發生礦化反應形成納米粒子；最后通過加入胎牛血清蛋白終止反應，使納米粒子不再增大，得到的順鉑礦化液可以直接使用。

所述的DMEM培養基的具體組分為本領域技術人員所熟知，具體可以為DMEM(H)培養基或DMEM(L)培養基。

作為優選，所述的改進型的DMEM培養基中，Ca(NO₃)₂的濃度為420～430mg/l；KNO₃的濃度為540～550mg/l；NaNO₃的濃度為9300～9310mg/l。

作為優選，步驟(1)中，所述的取代反應為20～24h。