[發(fā)明專利]具有FRET效應的還原敏感型熒光納米膠束及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210568269.0
• 申請日: 2012-12-24
• 公開（公告）號: CN103102479A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發(fā)明（設計）人: 蔡林濤;石碧華;劉朋;龔萍;王碧
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳先進技術(shù)研究院
• 主分類號: C08G63/91
• 分類號: C08G63/91;C08G63/664;C08J3/09;C08J3/07;C08L67/04;C09K11/06;A61K47/34;A61K49/00;A61K9/107
• 代理公司: 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 劉誠;吳平

1.一種具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，包括：

制備mPEG-PCL；

將所述mPEG-PCL溶于四氫呋喃中，加入三乙胺并攪拌，再加入PNC，室溫攪拌反應過夜，經(jīng)純化處理得到mPEG-PCL-PNC；

將胱胺二鹽酸鹽溶于二甲基亞砜和吡啶的混合液中，室溫攪拌4小時，將所述mPEG-PCL-PNC溶于二甲基亞砜，混合所述胱胺二鹽酸鹽和mPEG-PCL-PNC的溶液，并于35~50℃下連續(xù)攪拌反應2~3天，在重蒸水中透析3~4天，收集透析產(chǎn)物，冷凍真空干燥后得到mPEG-PCL-s-s-NH₂；

將所述mPEG-PCL-s-s-NH₂溶于二甲基甲酰胺中，加入FITC，所述mPEG-PCL-s-s-NH₂與所述FITC的摩爾比為1:1~1:5，常溫下攪拌，反應過夜，在二甲基甲酰胺中透析1~2天，轉(zhuǎn)移至重蒸水中繼續(xù)透析2~3天，真空冷凍干燥得到mPEG-PCL-s-s-FITC；

將所述mPEG-PCL-s-s-NH₂溶于二甲基甲酰胺中，加入改性Dabcyl，所述mPEG-PCL-s-s-NH₂與改性Dabcyl的摩爾比為1:1~1:5，常溫下攪拌，反應過夜，在二甲基甲酰胺中透析1~2天，轉(zhuǎn)移至重蒸水中繼續(xù)透析2~3天，真空冷凍干燥得到mPEG-PCL-s-s-Dabcyl；及

將所述mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl分別溶于四氫呋喃中，然后按照所述mPEG-PCL-s-s-FITC與mPEG-PCL-s-s-Dabcy的質(zhì)量比為1:1~1:3的比例混合得到混合溶液，在攪拌的過程中滴加重蒸水，將滴加了重蒸水的混合溶液轉(zhuǎn)移到重蒸水中透析2~3天，得到具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述改性Dabcyl通過以下步驟制備：將Dabcyl溶于二甲基甲酰胺中，依次加入體積為所述二甲基甲酰胺的5~10倍量的二環(huán)己基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，常溫下攪拌反應過夜，離心后取上清，得到改性Dabcyl。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述制備mPEG-PCL包括步驟：

將用氫化鈣干燥，減壓蒸餾；取甲基化的聚乙二醇，于80℃抽真空1小時；往所述甲基化的聚乙二醇中加入辛酸亞錫和干燥的在氮氣保護下140℃反應8小時后，加入氯仿溶解反應產(chǎn)物，再用正己烷沉淀，抽濾，真空干燥后得到mPEG-PCL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述mPEG-PCL與所述三乙胺的摩爾比為300:1~100:1。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述mPEG-PCL與所述PNC的摩爾比為0.1:1~1:1。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述mPEG-PCL-PNC與胱胺二鹽酸鹽的摩爾比為0.01:1~0.1:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述純化處理為將反應過夜的反應液經(jīng)離心除去三乙醇胺鹽酸鹽，取上清液，加入體積為所述上清液的10~20倍的冰乙醚，抽濾，將固體物溶于四氫呋喃中，加入體積為所述四氫呋喃的10~20倍的冰乙醚，抽濾。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述在攪拌的過程中滴加重蒸水的體積為所述混合溶液的體積的1/2~1。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束的制備方法，其特征在于，所述將滴加了重蒸水的混合溶液轉(zhuǎn)移到重蒸水中透析2~3天中采用透析袋進行透析，所述透析袋為截留分子量為1000~3500的透析袋。

10.一種具有FRET效應的還原敏感型聚合物納米膠束，其特征在于，包括mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl，其中，具有FRET效應的供體FITC和受體Dabcyl通過共價交聯(lián)接合到mPEG-PCL-s-s-NH₂上，且所述mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl的質(zhì)量比為1:1~1:3。