[發明專利]以色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2基因的新用途

無效

• 申請號: 201210565143.8
• 申請日: 2012-12-24
• 公開（公告）號: CN102994513A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 李紹清;曹志賤;田裴秀子;朱英國
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/63;C12N1/21;C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 薛玲

1.以色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2或其編碼基因在提高植物抗蟲性中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述植物為水稻。

3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述蟲為鱗翅目害蟲。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

5.編碼以色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2的基因，其核苷酸編碼序列為SEQ?ID?NO.1所示。

6.含有權利要求5所述基因的表達載體。

7.根據權利要求6所述的表達載體，其特征在于，其出發載體為pCAMBIA1301。

8.根據權利要求6或7所述的表達載體，其特征在于，啟動所述基因表達的啟動子為水稻綠色組織特異性啟動子rbcS?promoter。

9.含有權利要求6~8任一項表達載體的宿主細胞。

10.制備包含以色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2基因的轉基因水稻的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、根據水稻密碼子偏愛性，人工合成以色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2基因核苷酸序列，通過PCR擴增得到序列為SEQ?ID?NO.1所示的全長序列；

B、酶切步驟A得到的序列和植物雙元表達載體pCAMBIA1301，構建轉基因植物雙元表達載體；

C、將步驟B中得到的轉基因植物雙元表達載體轉化入農桿菌宿主細胞；

D、培養包含轉基因植物雙元表達載體的農桿菌宿主細胞，并在合適條件下，侵染水稻愈傷；

E、篩選陽性愈傷并獲得含有色列金蝎昆蟲神經毒素多肽LqhIT2基因的轉基因水稻植株。