[發明專利]多聚胞嘧啶結合蛋白1在制備預防及治療帕金森病藥物中的應用

在審

• 申請號: 201210555379.3
• 申請日: 2012-12-19
• 公開（公告）號: CN103083646A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 霍麗蓉;王曉民;王蘭英;梁建濤
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬復興醫院
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61P25/16;A61P25/00
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及一種多聚胞嘧啶結合蛋白1（PCBP1）的新用途，具體涉及一種多聚胞嘧啶結合蛋白1（PCBP1）在制備預防及治療帕金森病藥物中的應用，屬于生物醫藥領域。

背景技術

帕金森病（Parkinson's?disease，PD）是一種較為常見的中樞神經系統退變性疾病，多發于中老年人，具有高發病率和高致殘率的特點。該病以隨意運動減少、肌僵直、肢體震顫和姿勢平衡障礙為主要臨床癥狀；以中腦黑質致密部多巴胺能神經元進行性變性使紋狀體中多巴胺（DA）含量減少，并伴有Lewy小體生成為主要病理特征。據“九五”調查資料顯示，約有50％的病人從未因PD癥狀到醫院就醫，因此實際患病人數可能遠遠超出統計數字。由于PD病程可長達十幾到幾十年，治療效果差和費用昂貴，因此給社會和家庭帶來沉重的負擔，對該病的研究是老年醫學的重要課題。

PD的發病機制尚未完全清楚，目前臨床最為有效的方法是采用左旋多巴替代治療，但仍不能有效阻止或減緩疾病的發展，提示單純補充DA治療的局限性。因此需要從PD多個發病機制中尋找治療的新途徑和突破口。氧化應激、線粒體損傷以及由此而產生的多種功能蛋白的錯誤折疊和炎性因子的增多等是公認的重要致病機制，細胞內游離鐵的增多可加劇氧化應激的發生。那么如何能找到抗氧化應激、抗炎及清除多余游離鐵的制劑是近幾年關注的焦點。

近年來，多聚胞嘧啶結合蛋白1（poly?C?binding?protein?1,PCBP1；或heterogeneous?nuclear?ribonuclear?protein?E1，hnRNP?E1或α-complex?protein?1,αCP1）的研究進展為我們這項發明的提出提供了契機。PCBP1功能多樣，在哺乳動物細胞內廣泛表達，包括中腦黑質神經元及神經膠質細胞。本研究率先展開直接將PCBP1在人源多巴胺能神經細胞中過表達，再使細胞接受氧化應激毒素6-羥基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）的作用，觀察PCBP1可能存在的對受損細胞的保護作用；確定PCBP1對受損細胞的保護效果后，以腺相關病毒為載體，將PCBP1重組腺相關病毒注入大鼠單側紋狀體，待其表達后，再將6-OHDA按相同部位注入大鼠雙側紋狀體，設立對照組，于不同時間觀察對照組，6-OHDA注射組（PD模型組）以及PCBP1+6-OHDA注射組（PD預防治療組）大鼠的行為學變化，以反映PCBP?1對多巴胺能神經元的保護作用以及對神經毒素6-OHDA的抗性作用。

國內外研究現狀及發展動態分析

（1）PD發病機制的復雜性及其治療措施的研究現狀

WHO?2001年的全球人口比例調查預測報告中指出，全球從2010年開始逐漸步入老齡化社會，而我國老齡化人口比例的增加要高于其它國家。因此威脅老年人的多種疾病也隨之日益受到關注。PD好發于中老年人，40歲前發病非常少見，提示神經系統老化和細胞凋亡與之有關。已有研究表明PD與遺傳因素、環境因素、興奮性毒性、氧化應激、免疫學異常等諸多因素有關。因其發病機制復雜，所以至今難以產生明確的治療手段和方法。Mandel等人在甲基苯基四氫吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydro-pyridine,MPTP)和6-OHDA的PD動物模型上均得出氧化應激的產生、鐵活性的增強、畸變的蛋白折疊和聚集，炎癥反應，內源性抗氧化劑的減少等是黑質神經元變性死亡的原因。蛋白質的錯誤折疊與聚合、氧化應激過度和線粒體功能喪失普遍被認為是PD疾病機制中的重要組成部分。

目前多種疾病如阿爾茨海默病(AD)、亨廷頓病(HD)以及朊蛋白病(PrD)和PD的病變細胞中都具有一個共同的特征，即在遺傳性或獲得性的原因作用下，胞內蓄積有大量錯誤折疊并易于聚合的蛋白質，因此派生了神經變性構象病的新概念。但迄今為止，還沒有基于蛋白的構象轉換和聚合以及細胞的反應機制而設計的臨床治療措施應用于神經變性疾病。已用于實驗的藥物包括化學藥品、分子伴侶、小分子多肽、單克隆抗體等，這些可減少蛋白錯誤折疊和聚集的措施一旦可以應用于臨床，將具有根治性的意義。