[發明專利]一種報春花的人工雜交繁殖方法

有效

• 申請號: 201210545704.8
• 申請日: 2012-12-17
• 公開（公告）號: CN103070064A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 馬永鵬;羅桂芬;吳之坤;田小玲;薛瑞娟
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 馬曉青

技術領域：

本發明涉及植物的雜交育種方法，具體涉及一種報春花的人工雜交繁殖方法。

背景技術：

報春花(Primula?L.)是世界著名觀賞花卉，因其色彩艷麗、觀賞價值較高而備受園藝學家青睞，被譽為“世界三大園藝植物”之一。而燈臺報春組(Section?Proliferae?Pax)是報春花屬中最受園藝學家們喜愛的組之一。霞紅燈臺報春(Primula?beesiana)和橘紅燈臺報春(Primula?bulleyana)均為多年生草本花卉，花美麗并且適應性較強(圖1)。霞紅燈臺報春花冠紫色，橘紅燈臺報春花冠黃色，是典型的自交不親和(self-incompatibility)植物，長期的異花授粉使其后代性狀分離廣泛，花型、花色等性狀上的一系列變異都難以穩定遺傳。目前國內多數花卉企業主要依靠進口國外的報春花雜種一代種子進行生產，傳統的育種方法中，采用連續多代自交的方法可以有效獲得性狀穩定遺傳的純合體，由于其具有自交不親和性，可采用蕾期授粉、切除柱頭、子房內授粉、離體受精、植物激素處理雌蕊等方法克服自交不親和性，使植物獲得自交系，但是這些方法的實施技術要求較高且繁瑣，得到的新品種的特異性、一致性、穩定性都不能讓人滿意。

發明內容：

本發明的目的是提供一種報春花的人工雜交繁殖方法。該方法培育的雜交F1代植株株型及花徑顯著增大，花量明顯增多，新穎性明顯，既能盆栽觀賞，也能做花壇、花帶的布置、綠化等，該育種方法易于實施，成本低廉，效果顯著。

本發明的下述技術方案用于達到上述的發明目的。

一種報春花的人工雜交繁殖方法，包括以下步驟：

(1)7月中旬，以橘紅燈臺報春(Primula?bulleyana)長柱花作為母本×霞紅燈臺報春(Primula?beesiana)長柱花為父本的雜交組合，套袋去雄，進行人工授粉，授粉后，再套袋，并掛牌標記，待花凋落時，去袋，保證果實在自然條件下發育，待果實成熟時，雜交種子采收、檢測并育種；

(2)將檢測后的雜交種子滅菌，滅菌過程為：種子在流動的自來水中沖洗30min后，用濾紙吸干表面水分，然后浸入到75%的酒精中消毒10s，取出，用無菌水沖洗3-5遍后，浸入0.1%升汞中消毒8min，取出，用無菌水沖洗3-5遍；

(3)激素浸種，用300mg/L?GA+20mg/L?IBA+50mg/L?6-BA浸泡種子12小時；

(4)無菌播種與小苗移栽：播種培養基為1/2MS培養基；萌發后30天左右，將其轉入MS+1mg/L?ZT+0.1mg/L?NAA增殖培養基進行增殖；生根培養基為1/2MS+1mg/LNAA；培養30天后將培養瓶移至大棚70%~75%自然光遮光度下煉苗10～15天，然后將其取出，洗凈根部的培養基；

(5)將步驟(4)的小苗移栽到消毒處理過的基質，所述基質為紅土∶腐殖土∶珍珠巖∶蛭石按體積比為1∶1∶1∶2混合；保持濕度在75%，遮光度為70%~75%，30天后成活率達到95%以上。

所述的方法中，步驟(1)中的雜交種子檢測方法為：種子通過數字化X光樣品成像系統(MX-20-DC12，Faxitron，USA)的X射線照射，然后照相，統計所檢測種子的胚敗育情況，選擇具有正常發育胚的種子進行后續繁育。

所述的方法中，步驟(1)中的人工授粉時機為柱頭分泌粘液。

本發明的方法可更具體地描述為：

1、本發明分別以霞紅燈臺報春與橘紅燈臺報春，各自的長柱花和短柱花分別作為父母本，進行了以下8個組合的人工授粉實驗：a)霞紅燈臺報春(pin)♀×橘紅燈臺報春(pin)♂;b)霞紅燈臺報春(pin)♀×橘紅燈臺報春(thrum)♂;c)霞紅燈臺報春(thrum)♀×橘紅燈臺報春(pin)♂;d)霞紅燈臺報春(thrum)♀×橘紅燈臺報春(thrum)♂;e)橘紅燈臺報春(pin)♀×霞紅燈臺報春(pin)♂;f)橘紅燈臺報春(pin)♀×霞紅燈臺報春(thrum)♂;g)橘紅燈臺報春(thrum)♀×霞紅燈臺報春(pin)♂;h)橘紅燈臺報春(thrum)♀×霞紅燈臺報春(thrum)♂。

2、在7月中旬，將尚未開放的花套袋；待花開放后，用鑷子去雄，按照以上組合進行相互授粉實驗。授粉后，再套袋，并掛牌標記。待花凋落時，去袋，保證果實在自然條件下發育。待果實成熟時，統計坐果率和每顆果實的種子數目。