[發明專利]冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶、編碼基因及應用

無效

• 申請號: 201210535846.6
• 申請日: 2012-12-10
• 公開（公告）號: CN103045550A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 鄭裕國;柳志強;吳暉;李邦良;吳玲芳;許靜;許峰;薛亞平;袁水金;王鴻艷
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學;杭州中美華東制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12P17/12;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶，其特征在于所述酶具有SEQ?ID?No.1所示氨基酸序列90%以上同源性。

2.如權利要求1所述冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶，其特征在于所述酶的氨基酸序列為SEQ?ID?No.1所示。

3.如權利要求1所述冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶在生物催化二氫乳清酸制備乳清酸中的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述的應用為：以含冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶菌體發酵培養獲得的濕菌體經細胞破碎后的破碎混合液為催化劑，以二氫乳清酸為底物，在NAD的作用下，于pH為6.5~8.5的緩沖溶液構成的轉化體系中，在30℃、150rpm條件下轉化反應2~3h，反應結束后，將反應液過濾，取濾液即為含氨甲酰磷酸的粗品，所述粗品分離純化獲得氨甲酰磷酸。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于所述底物的初始濃度為10g/L，所述催化劑的體積用量為100mL/g底物，所述催化劑的干菌體濃度為6.7mg/mL，所述NAD與底物的質量比為1:1。

6.一種編碼權利要求1所述酶的基因。

7.如權利要求6所述基因，其特征在于所述基因具有SEQ?ID?No.2所示核苷酸序列90%以上同源性。

8.如權利要求7所述基因，其特征在于所述基因的核苷酸序列為SEQ?ID?No.2所示。

9.如權利要求6~?8之一所述基因在構建能夠生物催化二氫乳清酸制備乳清酸的基因工程菌中的應用。

10.如權利要求9所述的應用，其特征在于所述的應用為：構建含有所述冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶基因的重組載體，將所述重組載體轉化至大腸桿菌中，獲得的重組基因工程菌進行誘導培養，培養液分離純化獲得含有冬蟲夏草中國被毛孢二氫乳清酸氧化酶的菌體細胞。