[發(fā)明專利]冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶、編碼基因及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210535250.6
• 申請日: 2012-12-10
• 公開（公告）號: CN103045548A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭裕國;柳志強(qiáng);吳暉;李邦良;許靜;吳玲芳;許峰;薛亞平;袁水金;王鴻艷
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué);杭州中美華東制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12P19/30;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶，其特征在于所述酶具有SEQ?ID?No.1或SEQ?ID?No.3所示氨基酸序列90%以上同源性。

2.如權(quán)利要求1所述冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶，其特征在于所述酶的氨基酸序列為SEQ?ID?No.1或SEQ?ID?No.3所示。

3.如權(quán)利要求1所述冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶在生物催化二磷酸嘧啶核苷制備脫氧二磷酸嘧啶核苷中的應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的應(yīng)用為：以含冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶菌體發(fā)酵培養(yǎng)獲得的濕菌體經(jīng)細(xì)胞破碎后的破碎混合液為催化劑，以二磷酸嘧啶核苷為底物，于pH為6.5~8.5的緩沖溶液構(gòu)成的轉(zhuǎn)化體系中，在30℃、150rpm條件下轉(zhuǎn)化反應(yīng)2~3h，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液過濾，取濾液即為含脫氧二磷酸嘧啶核苷的粗品，所述粗品分離純化獲得脫氧二磷酸嘧啶核苷。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述底物的初始濃度為10g/L，所述催化劑的體積用量為100mL/g底物，所述催化劑的干菌體濃度為6.7mg/mL。

6.一種編碼權(quán)利要求1所述酶的基因。

7.如權(quán)利要求6所述基因，其特征在于所述基因具有SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示核苷酸序列90%以上同源性。

8.如權(quán)利要求6所述基因，其特征在于所述基因的核苷酸序列為SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示。

9.如權(quán)利要求6~8之一所述基因在構(gòu)建能夠生物催化二磷酸嘧啶核苷制備脫氧二磷酸嘧啶核苷的基因工程菌中的應(yīng)用。

10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述的應(yīng)用為：構(gòu)建含有所述冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶基因的重組載體，將所述重組載體轉(zhuǎn)化至大腸桿菌中，獲得的重組基因工程菌進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)液分離純化獲得含有冬蟲夏草核糖核苷酸還原酶的菌體細(xì)胞。