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[發(fā)明專利]msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株無(wú)效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201210533952.0 申請(qǐng)日: 2012-12-12
公開(kāi)(公告)號(hào): CN102965325A 公開(kāi)(公告)日: 2013-03-13
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 余瓊 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 黑龍江大學(xué)
主分類號(hào): C12N1/21 分類號(hào): C12N1/21;C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00;C12R1/19
代理公司: 暫無(wú)信息 代理人: 暫無(wú)信息
地址: 150080 黑龍*** 國(guó)省代碼: 黑龍江;23
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: msct ctx 融合 蛋白 轉(zhuǎn)基因 工程 菌株
【權(quán)利要求書】:

1.msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株名為大腸桿菌BL21(DE3-msCT/CTx),大腸桿菌BL21(DE3-msCT/CTx)按以下步驟制備:

一、將含有msCT-CTx融合蛋白基因的質(zhì)粒載體pUC(msCT/CTx)用BamH?I和EcoRⅠ雙酶切,獲得msCT-CTx融合蛋白的DAN片段;

二、用BamHI和EcoRⅠ雙酶切質(zhì)粒pGEX-6P-1;

三、msCT-CTx融合蛋白的DAN片段與經(jīng)過(guò)雙酶切的載體pGEX-6P-1進(jìn)行酶連接,然后16℃放置連接過(guò)夜,得到載體pGEX-msCT/CTx;

四、用載體pGEX-msCT/CTx轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),選擇陽(yáng)性重組子,即獲得msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌大腸桿菌BL21(DE3-msCT/CTx)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中質(zhì)粒載體pUC(msCT/CTx)酶切反應(yīng)體系為

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟三中質(zhì)粒pGEX-6P-1酶切反應(yīng)體系為

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟二中酶連接反應(yīng)體系為

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中msCT-CTx融合蛋白的基因序列如SEQ?ID?NO:1所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的msCT-CTx融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中msCT-CTx融合蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。

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