[發(fā)明專利]壬基酚人工抗原的制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210533788.3 | 申請(qǐng)日： | 2012-12-12 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103012582A | 公開（公告）日： | 2013-04-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 甘金華 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C07K14/765 | 分類號(hào)： | C07K14/765 |
| 代理公司： | 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001 | 代理人： | 王敏鋒 |
| 地址： | 430000 湖北省武*** | 國(guó)省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 壬基 人工 抗原 制備 方法 | ||
1.一種壬基酚人工抗原的制備方法，其步驟是：
(1)?按摩爾比1:1.3稱取壬基酚和琥珀酸酐置于500ml反應(yīng)瓶中，加入DMSO作為溶劑，90℃反應(yīng)1h后冷卻至室溫?，將冷卻的反應(yīng)液加入到超純水中，邊滴加邊攪拌，溶液變成乳白色，上面浮著一層淡黃色的油狀物，將上述物質(zhì)進(jìn)行抽濾沉淀，用冰超純水洗滌后抽干，50℃烘干后重結(jié)晶3次，干燥得到的淡黃色油狀物為NP-HS;
?(2)?按摩爾比30：30：1稱取N-羥基琥珀酰亞胺：水溶性碳二亞胺：牛血清白蛋白共溶于0.01mol/lPBS中，4℃下攪拌反應(yīng)過(guò)夜，將上述溶液離心5000r/min，10min，所得上清液為A液；按摩爾比30:6.5的比例稱取NP-HS溶解于?N,N-二甲基甲酰胺中，待完全溶解后，用移液槍取1/2體積的上清液A，以邊滴加邊攪拌的方式加入到NP-HS溶液中，避光反應(yīng)3-5h，將反應(yīng)后的溶液離心5000r/min，10min，上清液為B，取上清液B，以PBS溶液做透析液，置4℃透析3天，每7-9h換一次透析液，除去未反應(yīng)的DMF、CDC、NHS、NP小分子物質(zhì)，將透析的反應(yīng)液用棕色玻璃小瓶分裝后置于-40℃冰箱中冷凍過(guò)夜，然后轉(zhuǎn)移到冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行干燥，獲得一種壬基酚人工抗原，于-20℃冰箱保存。
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