[發(fā)明專利]CM瓊脂基層析微球制備技術

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210526002.5
• 申請日: 2012-11-27
• 公開（公告）號: CN103831066A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發(fā)明（設計）人: 魏葉堂;劉玉龍;高發(fā)信
• 申請（專利權）人: 山東鼎欣生物科技有限公司
• 主分類號: B01J13/02
• 分類號: B01J13/02;B01J13/14;C08J3/12;C08L5/12
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及一種CM瓊脂基層析微球制備技術。

背景技術

由于瓊脂糖具有良好的親水性和生物相容性，常規(guī)pH和溫度范圍內穩(wěn)定，耐受強酸和強堿的清洗，且再生容易，瓊脂糖是現今層析介質中應用得最為廣泛的基質材料。目前，國內生產的瓊脂糖基的層析介質，除了具體性能有待于考察和檢驗外，并沒有形成規(guī)模，在市場上也沒有表現出良好競爭能力，大多數研究單位和生產企業(yè)采用進口產品，但是國外商品介質價格昂貴，且逐年上漲，亟需要國產同等性能的產品來替代，因此，瓊脂糖基高效層析介質的規(guī)模化制備對于促進我國生物下游技術的發(fā)展具有重要意義。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是針對現有技術的不足，提供一種CM瓊脂基層析微球制備技術，利用乳化-冷卻法制得了瓊脂糖凝膠微球，在此基礎上，利用交聯、功能化制備出了具有良好分離性能的弱陽離子型CM瓊脂基層析微球。

本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種CM瓊脂基層析微球制備技術，具體包括如下步驟：

(1)、將90℃6％瓊脂溶液(含10％硫酸鈣)加入已預熱90℃的液體石蠟中，保溫攪拌30min，自然降溫至室溫，并維持攪拌速度，繼續(xù)攪拌15min，離心，異丙醇洗滌，制得的瓊脂糖微球。

(2)、將瓊脂糖微球放入反應器中，加入異丙醇，加入環(huán)氧氯丙烷，攪拌2h，加入NaOH，攪拌2h，然后，加熱，保溫65℃12h，自然冷卻至室溫，將樣品過濾，得環(huán)氧化交聯瓊脂糖微球。

(3)、將環(huán)氧化交聯瓊脂糖微球放入反應器中，加入異丙醇，加入NaOH，攪拌2h，加入氯乙酸，加熱，保溫85℃10h，自然冷卻至室溫，將樣品過濾，用EDTA、水和乙醇洗凈，室溫干燥，得球型良好，粒徑范圍在50-150um之間的CM瓊脂基層析微球。

具體實施方式

附圖為本發(fā)明制備工藝流程圖。

實施例

如制備工藝流程圖所示的一種CM瓊脂基層析微球制備技術，制備步驟如下：

(1).將90℃6％瓊脂溶液(含10％硫酸鈣)加入已預熱90℃的液體石蠟中，保溫攪拌30min，自然降溫至室溫，并維持攪拌速度，繼續(xù)攪拌15min，離心，異丙醇洗滌，制得的瓊脂糖微球。

(2)、將25mL瓊脂糖微球放入反應器中，加入25ml異丙醇，加入5ml環(huán)氧氯丙烷，攪拌2h，加入2g?NaOH，攪拌2h，然后，加熱，保溫65℃12h，自然冷卻至室溫，將樣品過濾，得環(huán)氧化交聯瓊脂糖微球。

(3)、將環(huán)氧化交聯瓊脂糖微球放入反應器中，加入50ml異丙醇，加入8gNaOH，攪拌2h，加入8g氯乙酸，加熱，保溫85℃10h，自然冷卻至室溫，將樣品過濾，用EDTA，水和乙醇洗凈，室溫干燥，得球型良好，粒徑范圍在50-150um之間的CM瓊脂基層析微球。