[發明專利]一種利用基因工程提高球孢白僵菌高滲、氧化脅迫抗性和毒力的方法

無效

• 申請號: 201210516164.0
• 申請日: 2012-12-05
• 公開（公告）號: CN103173467A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 張永軍;何張江;羅志兵;裴炎;范艷華
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/80;C12N1/15;A01N63/04;A01P7/04;C12R1/645
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種分離的Bbtmp1基因，所述Bbtmp1基因編碼球孢白僵菌穿膜蛋白且定位于球孢白僵菌線粒體膜，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示。

2.一種提高球孢白僵菌對高滲、氧化脅迫抗性和毒力的方法，通過破壞球孢白僵菌Bbtmp1基因或改變球孢白僵菌Bbtmp1基因表達方式，獲得球孢白僵菌突變菌株，提高球孢白僵菌對高滲脅迫和氧化脅迫的耐受性與毒力。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，利用除草劑抗性基因bar置換Bbtmp1基因的部分編碼區，構建同源重組表達載體而破壞球孢白僵菌Bbtmp1基因。

4.一種通過基因工程方法構建的球孢白僵菌突變菌株，其特征在于，通過下述步驟獲得所述突變菌株：

1)從野生型球孢白僵菌中分離球孢白僵菌Bbtmp1基因；

2)以基因工程方法破壞球孢白僵菌Bbtmp1基因或改變球孢白僵菌Bbtmp1基因表達方式，獲得重組表達載體；

3)將步驟2)獲得的重組表達載體轉入球孢白僵菌野生菌株，破壞球孢白僵菌Bbtmp1基因，獲得球孢白僵菌突變菌株，所述突變菌株具有提高的對高滲脅迫和氧化脅迫的耐受性與毒力。

5.如權利要求4所述的球孢白僵菌突變菌株，其特征在于，所述步驟2)中，利用除草劑抗性基因bar置換Bbtmp1基因的部分編碼區，構建同源重組表達載體而破壞球孢白僵菌Bbtmp1基因。

6.一種真菌殺蟲劑，含有權利要求4或5所述的球孢白僵菌突變菌株。

7.如權利要求1所述的Bbtmp1基因在制備真菌殺蟲劑中的用途。