[發明專利]苯炔類化合物及其制備方法及在水稻病原菌防治上的應用

有效

• 申請號: 201210514877.3
• 申請日: 2012-12-05
• 公開（公告）號: CN102993030A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 鄭永標;黃建忠;劉艷如;吳小君
• 申請（專利權）人: 福建師范大學
• 主分類號: C07C215/54
• 分類號: C07C215/54;C12P13/00;A01N33/10;A01P3/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明涉及一種苯炔類化合物及其制備方法及在水稻病原菌防治上的應用，屬于生物防治領域。

背景技術

大型真菌不但種類繁多，而且是“創造系數”很高的生物類群。大型真菌中發現的天然產物結構多樣，并且具有抗細菌、促進神經生長因子合成、酶抑制劑、抗真菌、細胞毒、受體拮抗劑和抗氧化等多種生物活性。

擔子菌與人類的關系極為密切。在發現了一些種對抗腫瘤和預防冠心病方面有作用之后，受到了醫藥界的重視并引起極大的興趣。擔子菌產生的生理活性物質有多糖類、多肽和蛋白質、抗生素類、維生素類等，其中抗生素類包含聚乙炔類化合物，如田頭菇素（Agrocybin），HOCH2·(C≡C)3·CONH2，來源于Agrocybe?cylindracea，對革蘭氏陽性菌、陰性菌及真菌有拮抗作用。

微生物源農藥包括農用抗生素和活體微生物兩大類。其中農用抗生素是由抗生菌發酵所產生的具有農藥功能的次生代謝物質，它是有明確分子結構的化學物質。農用抗生素無疑是農藥中的一個重要組成。由于其源于生物，故越來越受到人們關注。目前，在害蟲的生物防治方面，真菌是研究、生產和應用最多的生物類群之前。真菌類生物農藥主要是生真菌，目前在世界上記載的約有100屬，800多種，大部分是兼性或專性病原體。真菌殺蟲劑的研究在我國有較長歷史，對制劑的安全性、防治松毛蟲和玉米螟等研究都做了大量工作，但工業化生產技術至今未解決，因而始終沒有正式商品問世。

開發具有防治水稻稻瘟病、紋枯病和細菌性條斑病等重大病害的綠色農藥，對保護稻田濕地功能和減少稻田由于化學農藥使用造成的面源污染具有重要意義，也可促進生態農業和綠色農業的發展。基于以上背景，開展本發明的研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種由真菌發酵產物制備的苯炔類化合物及其制備方法及在水稻病害防治中的應用。

本發明首先提供了一種苯炔類化合物，所述苯炔類化合物的分子式為C₁₀H₇NO，結構式如下：

本發明還提供了一種苯炔類化合物的制備方法，制備方法包括以下步驟：

1)液體培養及發酵產物處理：將花臉香蘑（Lepista?sordida）活化后進行液體深層發酵，液體深層發酵的培養基配方按重量比為：馬鈴薯16-25%，葡萄糖1.5-2.5%，余量為水，pH自然，0.1Mpa、121℃滅菌30min，置于25－28℃，180－230r/min恒溫搖床中培養10-15天；發酵結束后，用離心法將菌絲體與發酵液分離，發酵液用乙酸乙酯萃取，萃取液經脫水、濃縮，得到有機粗提物浸膏；

2)產物分離：將1)所述的有機粗提物浸膏用甲醇溶解，進行反相硅膠柱層析，用含體積比為1‰－1%?甲酸的甲醇-水梯度洗脫，對洗脫液組份用圓形濾紙片法測定抗菌活性（供試菌株為水稻細條病病原菌，下同），合并具有活性的組分，用甲醇溶解，進行凝膠柱層析，用含體積比為1‰－1%?甲酸的丙酮或甲醇溶液洗脫，洗脫液組份用圓形濾紙片法進行抑菌活性追蹤，收集活性組分進行正相硅膠柱層析，以氯仿裝柱，干法上樣，用含體積比為1‰－1%?甲酸的氯仿溶液洗脫，洗脫液組份同樣采用圓形濾紙片法進行抑菌實驗，得到有抑菌活性的苯炔類化合物。

步驟1）所述液體深層發酵的培養基配方按重量比為：馬鈴薯20%，葡萄糖2%，余量為水。

步驟2）中所述進行反相硅膠柱層析，用含體積比為1‰－1%?甲酸的甲醇-水梯度洗脫，其中甲醇所占體積比分別為：10%、20%、30%、40%、50%、60%。

本發明另外提供了所述的苯炔類化合物在水稻病害防治中的應用。所述水稻病害為水稻稻瘟病或水稻細條病。

本發明制備的苯炔類化合物對水稻細條病和水稻稻瘟病有較好的防治效果，可以利用菌株Lepista?sordida發酵制得，培養基原料來源廣泛，制備方法簡單，容易實現工業化生產。

附圖說明

圖1化合物LS5的化學結構式。

圖2不同濃度LS5對水稻稻瘟病菌孢子萌發的抑制（注：圖中數字表示化合物的濃度分別為0、1、2、4和8μg/100μL）。

圖3為化合物LS5對水稻細條病病原菌的抑制作用?(注：1表示每濾紙片含供試化合物5μg/mL，2和3為對照)。

具體實施方式

本發明提供的苯炔類化合物的的制備方法，其步驟為：