[發(fā)明專利]一種9-羰基-10,11-去氫澤蘭酮的快速提取檢測方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210510356.0
• 申請(qǐng)日: 2012-11-18
• 公開（公告）號(hào): CN102980956A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡延春;廖飛;王云飛;舒剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種9-羰基-10，11-去氫澤蘭酮的快速提取檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、樣品預(yù)處理：采集紫莖澤蘭葉片在沒有陽光的地方陰干或凍干，然后粉碎；

B、甲醇超聲一步提取法：稱取上述A步驟樣品，溶于甲醇，置于40MHz超聲提取器或超聲波清洗器，在40℃超生提取30min，提取2-3次，即提取完全，過濾得到濾液；

C、減壓蒸干：將步驟B所得的濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中40℃減壓蒸干，得到浸膏，按浸膏與甲醇的用量比為1∶5溶解，待完全溶解加入蒸餾水至甲醇含量為20％進(jìn)行分散；

D、萃取：上述C步驟的甲醇水提液用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，乙酸乙酯的量為甲醇水提液的1/2，取上層減壓蒸干得到浸膏；

E、硅膠拌樣，干法上樣進(jìn)行硅膠柱層析：按浸膏與硅膠H的用量比為1∶1～1∶2，攪拌混合后，加入層析柱后，先用二氯甲烷做洗脫液，洗去低極性雜質(zhì)；再用二氯甲烷∶乙酸乙酯98∶2(v/v)洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干得到浸膏；

F、過樹脂：浸膏溶于甲醇∶水∶三氯甲烷85∶10∶5(v/v/v)溶劑中，上XAD-2/D101大孔樹脂柱洗脫以除去色素等雜質(zhì)，收集洗脫液，減壓蒸干得到粗品，粗品反復(fù)硅膠層析，并且分時(shí)間段收集洗脫液，薄層色譜法對(duì)洗脫液進(jìn)行分類及合并同類項(xiàng)，展開劑為石油醚∶丙酮/12∶1(V/V)，Rf值為0.45的收集液為所提取物質(zhì)；

G、HPLC檢測：上述F步驟所得物質(zhì)用HPLC進(jìn)行濃度檢測，HPLC條件：C18色譜柱規(guī)格為：250mm×4.6mm，5.0μm；流動(dòng)相為20％-100％的甲醇；流速為1mL·min^-1；進(jìn)樣量10μL；檢測波長為255nm；柱溫為25℃；梯度洗脫時(shí)間程序?yàn)?-10min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的9-羰基-10，11-去氫澤蘭酮的快速提取檢測方法，其特征在于，步驟B中樣品和甲醇的質(zhì)量比為1∶10。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的9-羰基-10，11-去氫澤蘭酮的快速提取檢測方法，其特征在于，步驟E中浸膏與硅膠H的用量比1∶2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的9-羰基-10，11-去氫澤蘭酮的快速提取檢測方法，其特征在于，步驟G中，梯度洗脫時(shí)間程序?yàn)?0min。