[發明專利]電感耦合等離子體質譜在氯高鐵血紅素藥物檢測中的應用

有效

• 申請號: 201210483525.6
• 申請日: 2012-11-23
• 公開（公告）號: CN102967649A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 陳西敬;趙娣;江驥;胡蓓;張永杰;王越;張訓纓;唐明清;劉進兵;王子厚
• 申請（專利權）人: 新疆科麗生物技術有限公司
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.測定動物(例如大鼠)血漿中穩定性同位素⁵⁸Fe濃度的方法，該方法是使用ICP-MS法進行測定，其包括以下步驟：

(1)提供電感耦合等離子體質譜儀(其例如Thermo?SCIENTIFIC的型呈為X?SERIES2的ICP-MS儀)；

(2)確定ICP-MS的工作條件；

(3)提供穩定性同位素⁵⁸Fe金屬粉末、標記后的氯高鐵血紅素、內標元素(例如鍺元素)、曲拉通等；

(4)配制標準溶液和內標溶液(例如分別配制含⁵⁸Fe濃度為2mg/mL的儲備液，溶劑例如可以是1.7%~2.3%的硝酸；例如分別配制含鍺濃度為1mg/mL的內標溶液，溶劑例如可以是1.7%~2.3%的硝酸，溶劑例如可以是2%的硝酸)；

(5)ICP-MS稀釋劑的配制(在一個實施方案中，該ICP-MS稀釋劑中含有水、曲拉通、硝酸和丁醇。在一個實施方案中，該ICP-MS稀釋劑中曲拉通、硝酸和丁醇三者的重量比為1：4.5-5.5：180-220。例如該ICP-MS稀釋劑中曲拉通、硝酸和丁醇三者的重量比為1:5:200。例如按照1:5:200的比例，用去離子水配制ICP-MS稀釋劑，使得去離子水中曲拉通、硝酸和丁醇的比例分別0.01%、0.05%和2%)；

(6)標準曲線的建立：取Eppendorf管9個，加入⁵⁸Fe對照品溶液50μL，于37°C恒溫水浴揮干后，分別加入大鼠空白血漿50μL，混勻后加入所配制的ICP-MS稀釋劑，使得⁵⁸Fe在血漿中的濃度分別為0、5、10、20、50、100、200、800、1000ng/mL，渦旋混合30秒，借助三通裝置，進行在線加入內標(鍺，50ng/mL)，進樣測定，以校正后的響應值ICPS為縱坐標，濃度C(ng/mL)為橫坐標，進行回歸，得⁵⁸Fe的標準曲線；

(7)血漿中⁵⁸Fe的濃度測定：取含有⁵⁸Fe(例如服用含⁵⁸Fe的物質)的動物(例如大鼠)血漿樣品50μL至Eppendorf管，加入ICP-MS稀釋劑950μL，混勻后置冰箱(4°C)冷藏，進樣測定，用步驟(6)所得標準曲線確定血漿中⁵⁸Fe的濃度。

進一步地，其中所述ICP-MS的工作條件為：離子源為ICP源，采用石英玻璃同心霧化器(0.8mL/m)，整體型石英炬管，1.5mm口徑噴射；霧化器氬氣的流量為0.6～0.8L/min；檢測模式為CCT模式(使用含7%(v/v)H₂的He作為碰撞氣)；檢測器模擬級電壓為1880v，檢測器脈沖級電壓為3812v，射頻功率為1300w，冷卻氣流量為11.0~15.0L/min，樣品提升量為1mL/min，樣品提升時間為40s，重復次數為3次，分別選擇鐵Fe(54，58)，鎳Ni(58)，鉻Cr(53)，鍺Ge(72)為掃描元素，掃描方式為跳峰掃描。

2.根據權利要求1的方法，其中所述ICP-MS的工作條件中，冷卻氣流量為12.0~14.0L/min。

3.制備⁵⁸Fe標記的氯高鐵血紅素的方法，該方法包括以下步驟：使用⁵⁸Fe和鹽酸或氯化氫氣體，在無氧條件下制備無水氯化亞鐵；以此無水氯化亞鐵為原料與酸化的原卟啉鈉反應，經過后處理制備出以⁵⁸Fe標記的氯高鐵血紅素。