[發(fā)明專利]一種嗜熱鏈球菌凍干保護劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210470494.0
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102952771A
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳合;李串娜;舒國偉;王勇
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12R1/46
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 汪人和

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于嗜熱鏈球菌保存技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種嗜熱鏈球菌凍干保護劑及其制備方法。

背景技術(shù)

近年來，隨著我國人民生活水平的提高和健康意識的增強，酸奶產(chǎn)量平均每年以25%的速度增長，這對酸奶發(fā)酵劑的品質(zhì)、特性、種類提出了新的要求。嗜熱鏈球菌是酸奶生產(chǎn)中制備發(fā)酵劑的常用乳酸菌種之一，酸奶的產(chǎn)品質(zhì)量與發(fā)酵劑質(zhì)量的優(yōu)劣密切相關(guān)。

目前嗜熱鏈球菌菌粉的制備主要采用真空冷凍干燥技術(shù)。真空冷凍干燥是生產(chǎn)商品化乳酸菌發(fā)酵劑的一項關(guān)鍵技術(shù)。它是將欲保藏的微生物細(xì)胞在真空條件和凍結(jié)狀態(tài)使冰升華,最后達(dá)到干燥。在這些條件下,微生物的生命活動將處于休眠狀態(tài),它們的代謝是相對靜止的,可以被長期保存。然而，冷凍干燥過程中不可避免會對乳酸菌細(xì)胞造成一定的損傷或死亡以及某些酶蛋白分子的鈍化。如果保護劑的選擇不當(dāng)，則發(fā)酵劑活力會隨之下降。因此，選擇嗜熱鏈球菌的合適的凍干保護劑具有重要意義。

關(guān)于嗜熱鏈球菌保護劑的報道有很多，主要集中于醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域。蒲麗麗等研究了多種保護劑對嗜熱鏈球菌的保護作用，發(fā)現(xiàn)海藻糖的保護效果最好，它能顯著抑制冰晶生成的形態(tài)不穩(wěn)定性。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)張英華通過單因素比較和正交試驗設(shè)計，確定適合嗜熱鏈球菌的最佳凍干保護劑配方為脫脂乳粉12%、海藻糖1%、甘油3%、谷氨酸鈉1%。呂加平等用蔗糖、乳糖、海藻糖、麥芽糊精等13種材料對乳酸菌凍干保護效果進行了比較，結(jié)果表明，海藻糖、側(cè)金盞花醇為最佳保護劑。于修鑑對半胱氨酸、脫脂乳粉、谷氨酸鈉、殼聚糖等保護劑組成的復(fù)合凍干保護劑進行響應(yīng)面優(yōu)化實驗，結(jié)果表明：對乳酸菌影響最大的保護劑是半胱氨酸，經(jīng)過優(yōu)化取得的最優(yōu)值分別為：脫脂乳粉9.7%，半胱氨酸0.03M，谷氨酸鈉3.2%。東北林業(yè)大學(xué)趙敏等研究了影響嗜熱鏈球菌活菌存活率的重要因素，結(jié)果表明可信度大于80%的因素為PVP、可溶性淀粉、硫代硫酸鈉和麥芽糖。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的問題在于提供一種嗜熱鏈球菌凍干保護劑及其制備方法，用于制備高活性菌粉，在制備菌粉的過程中加入凍干保護劑，可提高菌體的抗冷凍能力，從而提高菌粉的凍干存活率。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

一種嗜熱鏈球菌凍干保護劑，以質(zhì)量份數(shù)計，包括以下組分：

脫脂乳粉10～20份、棉籽糖3～10份、大豆低聚糖4～10份、右旋糖苷D401.5～5.0份、三聚磷酸鈉0.3～0.8份、沒食子酸丙酯0.005～0.02份、蒸餾水100份。

所述的嗜熱鏈球菌凍干保護劑，以質(zhì)量份數(shù)計，包括以下組分：

脫脂乳粉10～14份、棉籽糖3～5份、大豆低聚糖4～6份、右旋糖苷D401.5～3.0份、三聚磷酸鈉0.3～0.6份、沒食子酸丙酯0.005～0.01份、蒸餾水100份。

一種嗜熱鏈球菌凍干保護劑的制備方法，包括以下步驟：

1）以質(zhì)量份數(shù)計，在蒸餾水中添加10～20份的脫脂乳粉，加熱溶解后用調(diào)節(jié)pH為6.9～7.1，滅菌，冷卻至室溫；

2）以質(zhì)量份數(shù)計，將棉3～10份的籽糖、4～10份的大豆低聚糖和1.5～5.0份的右旋糖苷D40溶解于蒸餾水中，滅菌，冷卻至室溫；

3）以質(zhì)量份數(shù)計，將0.3～0.8份的三聚磷酸鈉和0.005～0.02份的沒食子酸丙酯溶解于無菌生理鹽水中，然后用濾膜過濾除菌；

4）將步驟1）、2）、3）所制備的溶液混合，并調(diào)整水的總質(zhì)量份數(shù)為100份，得到嗜熱鏈球菌凍干保護劑。

所述的嗜熱鏈球菌凍干保護劑的制備方法，包括以下步驟：

1）以質(zhì)量份數(shù)計，在蒸餾水中添加10～14份的脫脂乳粉，加熱溶解后用調(diào)節(jié)pH為6.9～7.1，滅菌，冷卻至室溫；

2）以質(zhì)量份數(shù)計，將棉3～5份的籽糖、4～6份的大豆低聚糖和1.5～3.0份的右旋糖苷D40溶解于蒸餾水中，滅菌，冷卻至室溫；

3）以質(zhì)量份數(shù)計，將0.3～0.6份的三聚磷酸鈉和0.005～0.01份的沒食子酸丙酯溶解于無菌生理鹽水中，然后用濾膜過濾除菌；

4）將步驟1）、2）、3）所制備的溶液混合，并調(diào)整水的總質(zhì)量份數(shù)為100份，得到嗜熱鏈球菌凍干保護劑。

所述的步驟1）、步驟2）的滅菌是在100～115℃滅菌10～15min。

將所述嗜熱鏈球菌凍干保護劑與嗜熱鏈球菌泥等體積混合均勻，于-40℃預(yù)凍3～12h，然后-50～-56℃冷凍干燥18～24h，得到嗜熱鏈球菌菌粉。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果：