[發(fā)明專利]一種海參用抗嗜水氣單胞菌營養(yǎng)增強劑的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210465674.X
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN103815155A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設計）人: 謝克煥
• 申請（專利權(quán)）人: 大連德通生物技術(shù)開發(fā)有限公司
• 主分類號: A23K1/18
• 分類號: A23K1/18;A23K1/00;A23K1/14;A23K1/16;A23K1/10;A23K1/175
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1.一種海參用抗嗜水氣單胞菌營養(yǎng)增強劑的制備方法，其特征在于，

將嗜水氣單胞菌滅活產(chǎn)物與營養(yǎng)飼料混合，其重量比為1：2~10；其中，

所述的嗜水氣單胞菌滅活產(chǎn)物由以下方法制備：

（1）增菌：從嗜水氣單胞菌標準菌株的單一菌落中，挑取一菌環(huán)，接種到普通LB培養(yǎng)基中，進行發(fā)酵，37℃培養(yǎng)12h制得發(fā)酵產(chǎn)物；將發(fā)酵產(chǎn)物再接入嗜水氣單胞菌培養(yǎng)基中進行發(fā)酵，32~37℃培養(yǎng)24~48h，至菌懸液菌含量的終濃度為10⁷~10¹⁰cfu/g；

（2）洗滌：將步驟（1）獲得的發(fā)酵產(chǎn)物，以1:50的質(zhì)量比與PBS緩沖液混合，充分攪拌1~5min后，以4000~8000rpm轉(zhuǎn)數(shù)離心2~5min，以收集菌體；

（3）滅活處理：在收集的菌體中，按1:50的質(zhì)量比加入PBS緩沖液，再向混合液體中，按1：1000~4000重量比加入β-丙內(nèi)脂，100rmp振搖條件下，于4℃放置24h，然后于37℃放置2小時使其水解；

（4）干燥：上述步驟（3）所得的滅活產(chǎn)物噴霧干燥到營養(yǎng)飼料中，干燥24~36h，滅活產(chǎn)物與營養(yǎng)飼料混合，產(chǎn)物水份含量為2~5%，制得海參用抗嗜水氣單胞菌營養(yǎng)增強劑；

所述的營養(yǎng)飼料為：黃粉蟲沙50～70份；馬尾藻粉：25～40份；海蒿子15～35；大豆蛋白10～15份；魚粉：5～10份；螺旋藻2～5份；貽貝粉2～5份；低聚殼聚糖：1～4份；復合多維1～4份；復合多礦1～4份。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的嗜水氣單胞菌培養(yǎng)基，其配制方法如下：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，葡萄糖5g，無需調(diào)節(jié)pH，121℃下滅菌20min；冷卻備用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，按1：4000重量比加入β-丙內(nèi)脂。