[發明專利]一種黑根霉菌絲脂質體直接轉化方法

無效

• 申請號: 201210462778.5
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN102978233A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 邱立友;孫強;崔繼紅;柴冉;高玉千;戚元成;申進文
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12N15/80
• 分類號: C12N15/80;C12R1/845
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新;楊海霞

1.一種黑根霉菌絲脂質體直接轉化方法，其特征在于，包括以下步驟：

一）黑根霉菌絲脂質體轉化：

1）將幼嫩黑根霉濕菌絲與甘露醇水溶液混合后研磨，得菌懸液，備用；

2）將脂質體2000與質粒pEGFP-C1混勻，于-5－5℃放置15－60min，然后轉入到菌懸液中，混勻，于-5－5℃放置15－60min；

3）將步驟2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培養1－5天；

二）傳代培養：

4）挑取步驟3）經檢測帶有熒光的轉化子接種于PDA平板上25－30℃培養1－5天，共傳代培養5－8次。

2.如權利要求1所述黑根霉菌絲脂質體直接轉化方法，其特征在于，所述步驟1）具體為：將0.05－0.2g幼嫩黑根霉濕菌絲與0.5－2ml、濃度0.5－1.0mol/l的甘露醇水溶液混合。

3.如權利要求1所述黑根霉菌絲脂質體直接轉化方法，其特征在于，所述步驟2）具體為：取30－100μl脂質體2000與30－100μl質粒pEGFP-C1混勻。