[發(fā)明專利]一種卷曲乳桿菌及其應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210459484.7
• 申請(qǐng)日: 2012-11-15
• 公開（公告）號(hào): CN103074270A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張旻;杭曉敏;張和春;夏祎稚;陳培青
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交大昂立股份有限公司;上海諾德生物實(shí)業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K35/74;A61P31/04;C12R1/225
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 胡紅芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種乳桿菌屬的新菌株及其應(yīng)用，更準(zhǔn)確地說(shuō)，本發(fā)明描述了卷曲乳桿菌(Lactobacillus?crispatus)的一個(gè)新菌株LCR15，及其高耐酸性、高產(chǎn)過(guò)氧化氫特性、對(duì)陰道致病菌的抑菌作用和預(yù)防與治療陰道炎的功能。

背景技術(shù)

健康婦女陰道內(nèi)存在多種微生物，它們與宿主、環(huán)境之間構(gòu)成了相互制約、相互協(xié)調(diào)、動(dòng)態(tài)平衡的陰道微生態(tài)系統(tǒng)。健康婦女的陰道菌群主要由乳桿菌構(gòu)成，包括卷曲乳桿菌、詹氏乳桿菌和格氏乳桿菌等。正常情況下乳桿菌對(duì)陰道可以起到保護(hù)作用，而以乳桿菌占優(yōu)勢(shì)的陰道微生態(tài)的紊亂可以導(dǎo)致陰道炎。

細(xì)菌性陰道炎(BV?)是婦科的常見病、多發(fā)病。它是由于陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)、厭氧菌和陰道加德納菌過(guò)盛生長(zhǎng)、兼性厭氧性乳桿菌受抑制所引起的一種陰道粘膜炎癥性表現(xiàn)的綜合征。應(yīng)用抗生素治療,?雖然可暫時(shí)緩解BV?的癥狀，但也使本已減少的乳桿菌進(jìn)一步減少，加重陰道微生態(tài)失調(diào)，從而使BV?反復(fù)復(fù)發(fā)。

產(chǎn)H₂O₂乳桿菌是健康婦女陰道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌，是保護(hù)女性陰道免受病原體感染的重要因素。另外乳桿菌代謝產(chǎn)生的酸和一些抗微生物因子也可有效地抑制其他細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。有學(xué)者通過(guò)微生物培養(yǎng)鑒定發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生H₂O₂的乳桿菌的缺乏，可使陰道加德納菌、厭氧革蘭氏陰性桿菌、人型支原體、衣原體等增加。

卷曲乳桿菌為主要定植于人體陰道中的一種乳桿菌，也可定植于人體口腔和腸道。卷曲乳桿菌屬于幾種健康婦女陰道中的主要產(chǎn)H₂O₂的菌之一。很多研究表明，卷曲乳桿菌不但可改變陰道pH值（通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生乳酸），而且可以對(duì)陰道pH值變化做出反應(yīng)。健康陰道pH值在4.0左右，受到微生物感染后，其環(huán)境pH值會(huì)上升至中性左右。卷曲乳桿菌可能會(huì)具有以下三種生理作用：一、產(chǎn)生乳酸，降低陰道內(nèi)環(huán)境的pH?值，抑制非嗜酸性微生物的生成，刺激嗜酸性微生物的生成；二、產(chǎn)生H₂O₂調(diào)節(jié)陰道微生態(tài)平衡，防止外籍菌侵入引起的感染；三、粘附抑制，卷曲乳桿菌能夠粘附于陰道上皮細(xì)胞表面，同時(shí)抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌對(duì)陰道上皮細(xì)胞的粘附作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種卷曲乳桿菌LCR15，具有耐酸及高產(chǎn)過(guò)氧化氫特性，對(duì)陰道致病菌有抑菌作用，具有預(yù)防和治療陰道炎的功能。

實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的解決方案是:?

一種卷曲乳桿菌，所述卷曲乳桿菌在中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號(hào)為CGMCC?NO.6406。

上述卷曲乳桿菌LE16直接自健康人體腸道中分離獲得，已于2012年7月31日保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心（簡(jiǎn)稱CGMCC，地址為：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所），保藏登記號(hào)為CGMCC?No.?6406。

所述的卷曲乳桿菌?LCR15在抑制陰道致病菌中的應(yīng)用。

所述陰道致病菌是指枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、淺黃色微球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和蠟樣芽孢桿菌。

所述的卷曲乳桿菌在調(diào)節(jié)陰道菌群、預(yù)防和治療陰道炎中的應(yīng)用。

本發(fā)明的卷曲乳桿菌LCR15的形態(tài)為桿狀，具有強(qiáng)耐酸性以及高產(chǎn)過(guò)氧化氫的特性，革蘭氏染色陽(yáng)性，不形成芽孢，產(chǎn)生乳酸，兼性厭氧。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明的卷曲乳桿菌在顯微鏡（×1000倍）下的菌體形態(tài)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的卷曲乳桿菌LCR15利用葡萄糖、果糖、甘露糖、N-乙酰-葡萄糖胺、七葉靈、水楊甙（柳醇）、纖維二糖、麥芽糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、棉籽糖、淀粉和肝糖（糖原），不利用甘油、赤癬醇、D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、L-木糖、阿東醇、β-甲基-D-木糖甙、半乳糖、山梨糖、鼠李糖、衛(wèi)矛醇、肌醇、甘露醇、山梨醇、α-甲基-D-甘露糖甙、α-甲基-D-葡萄糖甙、苦杏仁甙、熊果甙、海藻糖（草糖）、菊糖、松叁糖、木糖醇、龍膽二糖、D-松二糖、D-來(lái)蘇糖、D-塔格糖、D-巖糖、L-巖糖、D-阿糖醇、L-阿糖醇、葡萄糖酸鈉、2-酮基-葡萄糖酸鈉和5-酮基-葡萄糖酸鈉。

本發(fā)明的卷曲乳桿菌LCR15發(fā)酵過(guò)程：于MRS液體培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)24h。

?實(shí)施例1：菌株鏡檢

無(wú)菌條件下用接種環(huán)挑卷曲乳桿菌LCR15，涂于載玻片上，制片并革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察菌體形態(tài)。