[發(fā)明專利]食用菌菌種的脫毒方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210453017.3
• 申請(qǐng)日: 2012-11-13
• 公開（公告）號(hào): CN102907258A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 左萬軍;文春貴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川省青川縣川珍實(shí)業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): A01G1/04
• 分類號(hào): A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種食用菌菌種的脫毒方法。

背景技術(shù)

食用菌生產(chǎn)領(lǐng)域，在推廣應(yīng)用新選育的食用菌菌種的過程中，由于易受病毒、病菌的危害，其性狀不穩(wěn)定、易退化、老化，優(yōu)良性狀難以保持長久，菌種的退化現(xiàn)象嚴(yán)重制約了食用菌生產(chǎn)的發(fā)展。生產(chǎn)中急需一種食用菌菌種的脫毒復(fù)壯技術(shù)，可抑制菌種的退化，保持并恢復(fù)菌種原有的優(yōu)良生物學(xué)特性和生產(chǎn)性狀。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的問題在于提供一種食用菌菌種的脫毒方法。

一種食用菌菌種的脫毒方法，包括如下步驟：

步驟一：常規(guī)法制作PDA培養(yǎng)基，無菌處理后，無菌條件下在PDA培養(yǎng)基表面滴入濃度0.25-0.5%的氯霉素?cái)?shù)滴，使之布滿培養(yǎng)基表面，常規(guī)組織分離接入待脫毒菌種，常規(guī)溫度培養(yǎng)；

步驟二：待菌絲發(fā)至1/2時(shí)，常規(guī)法接入二級(jí)種培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，出現(xiàn)1.5厘米大小的原基時(shí)，無菌條件下去掉原基表層，將其縱橫各劃切4-5刀，使成9-16塊的小組織塊，每支試管內(nèi)接入1-2塊，常規(guī)法培養(yǎng)；

步驟三：待菌絲發(fā)至1/2時(shí)，挑取菌絲尖端2-3mm處的菌絲體，再次接入PDA培養(yǎng)基，接入前按步驟一的方法用氯霉素處理PDA培養(yǎng)基表面，常規(guī)法培養(yǎng)；

步驟四：待菌絲發(fā)至1/2時(shí)，常規(guī)法接入二級(jí)種培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，重復(fù)步驟二的操作，分離原基組織接入PDA培養(yǎng)基，接入前按步驟一的方法用氯霉素處理PDA培養(yǎng)基表面，常規(guī)法培養(yǎng)；

步驟五：待菌絲發(fā)至1/2時(shí)，重復(fù)步驟三的操作，以尖端分離法分離菌絲，接入PDA培養(yǎng)基，接入前按步驟一的方法用氯霉素處理PDA培養(yǎng)基表面，常規(guī)法培養(yǎng)；

步驟六：待菌絲發(fā)至1/2時(shí)，常規(guī)法接入二級(jí)種培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，重復(fù)步驟二的操作，分離原基組織接入PDA培養(yǎng)基，接入前按步驟一的方法用氯霉素處理PDA培養(yǎng)基表面，常規(guī)法培養(yǎng)；

步驟七：常規(guī)法將步驟六所得菌種轉(zhuǎn)接至PDA培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，接入前按步驟一的方法用氯霉素處理PDA培養(yǎng)基表面，再通過常規(guī)法轉(zhuǎn)入二級(jí)種即可投入使用。

其原理如下：食用菌的常規(guī)組織分離技術(shù)并不能達(dá)到使菌種脫毒的目的，這是由于子實(shí)體已生長至中后期，攜帶病毒、病菌的概率相當(dāng)高。菌種脫毒的原理，就是采用先進(jìn)的尖端分離技術(shù)，配合對(duì)成熟菌絲體不同階段、不同形態(tài)自然生成物的分離技術(shù)以及選用不同基質(zhì)，使接入種有條件進(jìn)行選擇性生長，并經(jīng)2-4個(gè)循環(huán)后，使該菌種徹底擺脫原攜病毒、病菌，恢復(fù)其原本生物特性。根據(jù)該定義，根據(jù)品種的不同，反復(fù)2-4次循環(huán)，并有意令培養(yǎng)基處于不穩(wěn)定即所謂富養(yǎng)-貧瘠的交替條件下，通過一系列往復(fù)操作，使菌種在“脫”掉原攜病毒、病菌的前提下，自然恢復(fù)和產(chǎn)生較強(qiáng)抗性，保持并恢復(fù)菌種原有的優(yōu)良生物學(xué)特性和生產(chǎn)性狀。

菌種脫毒的操作過程需花費(fèi)較長時(shí)間，需嚴(yán)格控制脫毒時(shí)機(jī)進(jìn)行操作，主要技術(shù)要求如下：

（1）要求培養(yǎng)基的配方營養(yǎng)相對(duì)貧乏一些。斜面及平板培養(yǎng)基相對(duì)貧乏，食用菌菌絲較難發(fā)展，但某些病毒、病菌生長也很難發(fā)展，而食用菌菌絲相對(duì)較有生長優(yōu)勢(shì)，再次分離操作時(shí)，利用菌絲尖端遠(yuǎn)離病毒、病菌的條件，可將其“甩”在原在質(zhì)中而避免重新帶入新的培養(yǎng)基質(zhì)中，從而達(dá)到逐步脫毒的目的。

（2）常溫培養(yǎng)，或創(chuàng)造相對(duì)不適宜的溫度等條件，利用食用菌的生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)，達(dá)到脫毒的目的。一般情況下，可采取偏低溫度的條件，使食用菌菌絲能夠緩慢生長，某些病毒、病菌無法萌動(dòng)，由此達(dá)到分離目的。

（3）菌種脫毒采用的是“尖端”脫毒原理，因此，應(yīng)適時(shí)、及時(shí)地進(jìn)行分離操作，否則，一旦超過時(shí)限，病毒、病菌便會(huì)“跟蹤前進(jìn)”，使脫毒工作前功盡棄。一旦某環(huán)節(jié)被延長時(shí)間，則很難保證脫毒效果。

（4）脫毒操作需連續(xù)進(jìn)行，中間不得有停頓、保存等過程。如果因時(shí)間或其他條件無法完成本次操作，或?qū)⒛臣?jí)生物體進(jìn)行冰箱保存時(shí)，則難以達(dá)到脫毒目的。

本發(fā)明工藝有如下優(yōu)點(diǎn)：

1、菌種脫毒后，恢復(fù)了其原有生物學(xué)特性，無論在品種推廣還是在菇農(nóng)生產(chǎn)中，脫毒菌種將徹底保持品種的原有性狀。

2、菌種脫毒后，抗逆性明顯增強(qiáng)。包括對(duì)溫度、濕度等外界環(huán)境的抗性，以及以某些人為因素如通風(fēng)不及時(shí)、通風(fēng)量不足等不良生長條件的抗性等，在相對(duì)管理比較粗放的情況下，照樣長出好蘑菇。

3、脫毒菌種的抗病性提高，較常規(guī)菌種的發(fā)病率降低60%以上，黃褐病、褐斑病、褐腐病等病害很少發(fā)生，原種和栽培種的制種成活率可提高至95%以上。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

平菇菌種華平6號(hào)的脫毒，具體操作包括如下步驟：

第一循環(huán)?：