[發(fā)明專利]日本沼蝦MnIAG基因、其擴(kuò)增引物組及擴(kuò)增方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210422533.X
• 申請(qǐng)日: 2012-10-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103397037A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈懷舜;柏愛(ài)旭;任秀芳;周鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心
• 主分類號(hào): C12N15/16
• 分類號(hào): C12N15/16;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

1.一種日本沼蝦MnIAG基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示。

2.一種用于擴(kuò)增如權(quán)利要求1所述的日本沼蝦MnIAG基因的引物組，其特征在于由如下引物組成:

IAG正向簡(jiǎn)并引物IAG-F的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示；

IAG反向簡(jiǎn)并引物IAG-R的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示；

3′?正向外引物?3aMnIAG-F1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示；

3′?正向內(nèi)引物?3aMnIAG-F2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6所示；

5′?反向外引物?5aMnIAG-R1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.7所示；

5′?反向外引物?5aMnIAG-R2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示。

3.一種擴(kuò)增如權(quán)利要求1所述日本沼蝦MnIAG基因的方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟1：獲得日本沼蝦促雄性腺組織的總RNA；

步驟2：將已公開(kāi)的幾種甲殼類IAG基因進(jìn)行序列比對(duì)，找出保守序列，設(shè)計(jì)如權(quán)利要求2所述簡(jiǎn)并引物對(duì)，PCR擴(kuò)增得到MnIAG基因的保守序列；

步驟3：以所述MnIAG基因保守序列作為模板，設(shè)計(jì)如權(quán)利要求2所述引物組，擴(kuò)增獲得日本沼蝦MnIAG基因的3′?端和5′端片段；?

步驟4：將所述MnIAG基因保守序列、所述MnIAG基因的3'?端和5'?端片段拼接，即得。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在步驟3所述擴(kuò)增為套式兩輪PCR。?