[發明專利]分泌型Klotho在制備治療慢性腎臟病的藥物中的應用

無效

• 申請號: 201210394222.7
• 申請日: 2012-10-17
• 公開（公告）號: CN102861343A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 劉友華;周麗麗
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K38/17;A61P13/12
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 劉宇峰

技術領域

本發明涉及一種抗衰老基因片段及其蛋白產物在治療慢性腎臟病（CKD）中的用途，具體是涉及分泌型Klotho基因及其蛋白在制備治療CKD藥物中的用途。

背景技術

慢性腎臟病（CKD）最終進展至終末期腎功能衰竭（ESRD），患者終身依賴“腎臟替代治療”來維持生命。在過去的幾十年中，伴隨著人類社會的人口老齡化，CKD患病率呈現逐年上升趨勢（Nat?Rev?Nephrol,?2011,?7:?684-696）。有資料表明，CKD正成為一種“公眾健康問題”，嚴重危害人類健康并消耗大量衛生資源。然而，目前臨床上尚缺乏有效延緩CKD進展的藥物。針對CKD的發病機制，尋找有效地抑制或延緩CKD進展的藥物無疑是當前腎臟病學界的當務之急，成為亟待攻克的戰略重點之一。

近期研究顯示，衰老正成為CKD一個獨立的危險因素（Nat?Rev?Nephrol,?2011,?7:?706-717），提示這兩者可能存在密切的聯系。因此，研究衰老與CKD發病相關的內在機制具有重要的理論意義和潛在的臨床應用價值。近期研究和發明人預實驗的結果均顯示，Klotho作為一種新近發現的抗衰老蛋白（Ageing?Res?Rev,?2009,?8:?43-51），在正常的腎小管（包括近端小管、遠端小管和集合管）上皮細胞中高度表達（Cell?Struct?Funct,?2004,?29:?91-99），而在CKD疾病狀態下呈現明顯丟失（J?Am?Soc?Nephrol,?2011,?22:?124-136）。Klotho蛋白有兩種亞型，跨膜型（130?kDa）和分泌型（65?kDa）。研究表明分泌型Klotho類似于一種內分泌激素，可通過血液循環到達遠處組織發揮作用（Adv?Exp?Med?Biol,?2012,?728:?126-157）。這些結果提示，分泌型Klotho作為一種特殊的抗衰老因子，它的丟失可能在腎臟疾病的發生發展中具有非常重要的作用。

人類Klotho基因（GenBank：BAA23382.1）編碼含有1012個氨基酸的含有單一跨膜區的膜蛋白。分泌型Klotho基因僅編碼Klotho氨基末端的信號肽和KL1結構域（包含Klotho蛋白的1-500氨基酸），但缺失KL2結構域、跨膜區和胞內結構域。分泌型Klotho主要通過兩種方式產生，即mRNA轉錄后的替代剪切、或者全長Klotho蛋白在轉譯后胞外區域的剪切脫落。研究表明分泌型和全長序列Klotho在慢性腎臟病發生發展過程中都嚴重丟失。

單側輸尿管結扎（UUO）和阿霉素腎病（ADR）是經典的CKD動物模型，UUO模型的特點是可以快速完整地展示梗阻側腎小管間質纖維化的不同病理階段和特征，包括炎細胞浸潤、小管細胞的增殖和凋亡、上皮-間充質細胞轉化、肌成纖維細胞標志蛋白平滑肌肌動蛋白α（α-SMA）的表達、纖連蛋白（Fibronectin）和I型膠原（Collagen?I）的沉積。ADR腎病是目前常用的模擬人類腎小球疾病的模型，其特點是大量蛋白尿、腎小管內管型、腎小管塌陷、進行性局灶節段硬化（FSGS）和球性硬化、嚴重腎間質纖維化和炎癥形成。

在病理上，通常采用Masson染色，來觀察組織細胞外膠原蛋白沉積情況。而更具體的組織纖維化則常常應用肌成纖維細胞標志蛋白平滑肌肌動蛋白α、纖連蛋白和I型膠原的免疫染色和免疫印跡方法（western?blotting）來定性、定量觀察和評估。

發明內容

本發明的目的在于提供分泌型Klotho基因及其蛋白的新的用途。

本發明的一個方面涉及分泌型Klotho基因在制備治療慢性腎臟病的藥物中的用途。

根據本發明所述的用途的進一步特征，所述的藥物包括：編碼分泌型Klotho蛋白的基因，以及藥學上可接受的輔料。

根據本發明所述的用途的進一步特征，所述的藥物包括：包含所述編碼分泌型Klotho蛋白的基因的表達載體，以及藥學上可接受的輔料。

本發明的另一個方面涉及分泌型Klotho蛋白在制備治療慢性腎臟病的藥物中的用途。

根據本發明所述的用途的進一步特征，所述的藥物包括：分泌型Klotho蛋白，以及藥學上可接受的輔料。

根據本發明所述的用途的進一步特征，所述的藥物包括：表達分泌型Klotho蛋白的表達載體，以及藥學上可接受的輔料。