[發明專利]一種雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法

有效

• 申請號: 201210394013.2
• 申請日: 2012-10-08
• 公開（公告）號: CN102870526A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 趙光武;羊敏杰
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學
• 主分類號: A01C1/02
• 分類號: A01C1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于雜交水稻種子測定技術領域，尤其涉及一種雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法。

背景技術

種子是農業生產最基本的生產資料，種子活力是種子重要的質量性狀，高活力種子具有明顯的生長優勢和生產潛力，對農業生產具有十分重要的意義。隨著種子產業化和信息化的發展，種子活力快速測定在種子質量檢測和種子貿易中顯得越來越重要。目前種子活力的檢測方法可分為幼苗生長特性測定、逆境抗性測定和生化測定三大類，其中最常用的活力測定方法有幼苗生長測定、抗冷測定、低溫發芽、加速老化、種子浸出液電導率測定和ATP含量測定等。目前水稻種子活力測定最常用的方法仍然是基于發芽試驗的生長測定，常用發芽率、發芽勢、發芽指數等指標來評價其活力狀況。但在種子發芽試驗中常遇到種子因水分偏差、病菌蔓延等原因造成的爛床、霉變，從而導致發芽率不可靠的現象，并且標準發芽試驗存在手續煩，設備多，時間長等缺點。多年來，許多種子科學家都在尋找快速方法來代替發芽試驗。例如，在豌豆種子活力測定中的標準化方法電導法已廣泛應用于大豆、棉花、玉米等種子的活力測定。但電導法在水稻種子活力測定中因穩定性差，因此它主要作為輔助補充方法。經世界許多種子科學家用標準發芽與四唑測定的對比試驗表明，四唑測定結果與標準發芽率一般很接近，但檢測過程較繁瑣，且需要檢測者相當的經驗，檢測效率低。由此可見，目前的活力測定方法無法適應現代規模化的大批量種子的快速測定。

氧傳感技術(Q2技術)是荷蘭ASTEC?Global公司基于熒光猝滅原理開發的，通過測定種子萌發過程中的耗氧量來鑒定種子的質量水平。其自動化檢測的特點為種子活力的快速檢測提供了有效途徑。但目前氧傳感技術目前僅用于少數幾個植物(如甜菜、番茄、辣椒、杉木、馬尾松等)種子的活力檢測。筆者多年的研究結果表明，氧代謝指標IMT(萌發啟動時間)與杉木和馬尾松種子活力相關關系不穩定，但其它指標如氧氣消耗速率(OMR)與它們的活力呈正相關、與理論萌發時間(RGT)、關鍵氧氣壓力(COP)呈負相關。筆者利用氧傳感技術檢測引發后番茄種子的活力獲得了與發芽試驗一致的結果，引發后番茄種子的活力顯著提高(IMT、RGT值降低，OMR值增加)，與發芽試驗中發芽勢、發芽指數反映的結果一致。但并不是所有的氧代謝指標均能較好的反映其活力狀況，一些氧代謝指標與上述植物種子活力之間的關系并不密切，氧傳感檢測方法的準確性還有待進一步驗證。但水稻種子目前還沒有專門的氧傳感測定程序，且迄今未見應用氧傳感技術檢測雜交水稻種子活力的報道。

發明內容

針對上述問題，本發明實施例的目的在于提供一種快速、準確的雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法。

本發明實施例是這樣實現的，一種雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法，所述測定方法包括以下步驟：

稱取瓊脂，加入超純水，配制瓊脂溶液，加熱至全溶，每個塑料試管加入瓊脂溶液，待冷卻；

夾取種子，放入裝有已凝固瓊脂的塑料試管中，每個塑料試管中裝一粒水稻種子，在托板的邊緣貼上標簽，標注樣品及重復；

待種子全部放入塑料試管后，統一蓋上蓋子，最后將托板按樣品及重復依次擺放在Q2儀(氧傳感儀)上；

打開Q2的運行程序，創建新程序，對每個托板進行設置；設置運行時間、測定間隔時間、運行溫度等參數信息，以及樣品名稱、重復編號；

開始自動化測量，每次測量記錄1次氧氣濃度，Q2軟件會根據測定的氧氣濃度和時間繪制成耗氧曲線，計算氧代謝指標。

進一步，所述瓊脂溶液的配置方法為：

稱取瓊脂5.0g，加入1000ml超純水，配制0.4％～0.6％瓊脂溶液，加熱至全溶，每個塑料試管加入瓊脂溶液1000μl，待冷卻。

進一步，所述雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法，根據水稻種子大小選用1.5ml的塑料試管。

進一步，所述的雜交水稻種子活力氧傳感快速測定方法在加瓊脂溶液的過程中，根據水稻種子的呼吸強度在每個塑料試管中加入瓊脂溶液1000μl。

進一步，每次程序運行16個托板，每次取4個水稻品種，每個品種設4次重復，一個托板48粒種子為一次重復。

進一步，用鑷子夾取種子，放入裝有已凝固瓊脂的塑料試管中，每個塑料試管中裝一粒水稻種子，以靠近種胚部分接觸瓊脂面為宜。

進一步，所述快速測定方法中水稻種子以0.5％的濃度為最佳。