[發明專利]廣東涼茶顆粒電噴霧質譜指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜

無效

• 申請號: 201210389868.6
• 申請日: 2012-10-15
• 公開（公告）號: CN102914587A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 楊運云;鄧潔薇;張中強;宋化燦;范春林
• 申請（專利權）人: 中國廣州分析測試中心
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;G01N1/34
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種廣東涼茶顆粒的質量評價和來源區分方法，具體涉及廣東涼茶顆粒的直接電噴霧質譜指紋圖譜的構建方法和標準指紋圖譜。?

背景技術

廣東涼茶是嶺南人民根據本地的氣候和水土特性，在長期預防疾病與保健過程中以中醫養生理論為指導，以中草藥為基礎，研制總結出來的具有清熱解毒、生津止渴等功效的一類植物飲料。廣東涼茶顆粒是著名的廣東涼茶之一，由崗梅、山芝麻、五指柑、淡竹葉、木蝴蝶、布渣葉、火炭母、金沙藤、廣金錢草和金櫻根10味藥材組成，具有清熱解毒、祛濕生津、涼血排毒等功效，用于四時感冒、發熱喉痛、濕熱積滯、口干尿黃等癥。現已有王老吉廣東涼茶無糖顆粒、王老吉廣東涼茶含糖顆粒、香雪廣東涼茶含糖顆粒、觀鶴廣東涼茶含糖顆粒、龍馬廣東涼茶含糖顆粒和速永康廣東涼茶含糖顆粒等劑型在市場上銷售。?

目前國內還沒有文獻報道對廣東涼茶顆粒的質量評價和來源區分的研究。中藥指紋圖譜技術是一種表征中藥所含成分與其質量關系的有效手段，已成為國內外廣泛認可的重要質量評價模式。常規的指紋圖譜方法為色譜法，由于需要很長的色譜分離時間，無法滿足快速和高通量的要求。直接電噴霧質譜指紋圖譜可在常壓條件下直接進行指紋圖譜分析，不需要色譜分離，因此，分析時間大大縮短，一個完整的指紋譜圖分析僅僅需要不到30秒的時間，滿足了快速分析和高通量的要求。因此，建立廣東涼茶顆粒的快速、高效、高通量直接電噴霧質譜指紋圖譜方法，從整體上全面反映制劑的內在質量，為其質量控制提供一種提供直觀、簡便、有效的手段。?

發明內容

本發明的目的在于為廣東涼茶顆粒的質量評價、來源區分和真偽鑒別提供一種新的快速、可靠、高通量指紋圖譜方法，通過建立廣東涼茶顆粒電噴霧質譜指紋圖譜的方法，并由此方法得到廣東涼茶顆粒的標準指紋圖譜。?

為達到本發明的目的所采用的技術方案：用直接電噴霧質譜法建立廣東涼茶顆粒電噴霧質譜指紋圖譜的方法，具體包括如下步驟：?

(1)供試品溶液的制備：精密稱取廣東涼茶顆粒1～20g，50％～100％甲醇萃取，采用索氏萃取或超聲萃取或微波輔助萃取或加速溶劑萃取方法進行萃取，萃取時間為10～120min，萃取液濃縮定容至5～50mL，針孔式微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；?

(2)質譜條件：采用電噴霧質譜直接檢測，便攜式蠕動泵直接進樣，流速10～100μL/min，或高效液相色譜不經過色譜柱分離進樣，流速100～500μL/min；離子源采用電噴霧離子源；質譜質量分析器采用飛行時間或四級桿或離子阱或靜電場軌道阱或傅立葉變換離子回旋共振質量分析器；譜圖采用全掃描模式記錄質譜的輪廓圖，掃描質量范圍m/z?100～1000；?

(3)測定：取供試品溶液注入質譜儀，進樣量1～100μL，按照直接電噴霧質譜法測定，記錄質譜圖，得到指紋圖譜；?

(4)標準指紋圖譜：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》，均值法計算生成標準指紋圖譜。?

(5)主成分分析：供試品指紋圖譜采用統計學軟件進行主成分分析，進行質量評價和來源區分。?

本發明最佳的檢測方法可以通過下述步驟實施：(1)供試品溶液的制備：稱取廣東涼茶顆粒5.0g，加入甲醇50mL，超聲萃取30min，萃取液旋轉蒸餾濃縮至近干，加入5mL甲醇溶解，搖勻，針孔式微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；(2)質譜條件：50μL/min流速便攜式蠕動泵直接進樣，或流速200μL/min高效液相色譜不經過色譜柱分離進樣，電噴霧離子源，飛行時間質量分析器，全掃描模式記錄質譜的輪廓圖，掃描質量范圍m/z?100～1000；(3)測定：取供試品溶液注入質譜儀，進樣量5μL，按照直接電噴霧質譜法測定，記錄質譜圖，得到指紋圖譜；(4)標準指紋圖譜：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》，均值法計算生成標準指紋圖譜；(5)主成分分析：供試品指紋圖譜采用統計學軟件進行主成分分析，進行質量評價和來源區分。?

按照本發明所提供指紋圖譜的建立方法所得廣東涼茶顆粒的指紋圖譜中有61個特征離子共有峰，其中特征離子m/z?133為蘋果酸、m/z?191為奎尼酸、m/z?191為葡萄糖酸、m/z?353為綠原酸、m/z?515為異綠原酸。?

本發明的原理是根據廣東涼茶顆粒中主要的活性成分是藥材崗梅、山芝麻、五指柑、淡竹葉、木蝴蝶、布渣葉、火炭母、金沙藤、廣金錢草和金櫻根的提取物，其電噴霧質譜指紋圖譜能從整體面貌上把握廣東涼茶顆粒的質量。?

本發明的有益效果如下：?