[發(fā)明專利]一種生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生產(chǎn)二羥基丙酮的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210360914.X
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN103667369A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 許波;賀玉榮
• 申請（專利權(quán)）人: 北京貫虹科技集團有限公司
• 主分類號: C12P7/26
• 分類號: C12P7/26;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝，其特征在于包括以下步驟：

1)高產(chǎn)菌株發(fā)酵生產(chǎn)二羥基丙酮

將發(fā)酵菌株經(jīng)種子培養(yǎng)后接種于滅菌過的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵過程中通過氫氧化鈉和鹽酸溶液來控制pH值，此發(fā)酵過程在第一階反應(yīng)器中完成，之后將菌懸液混以海藻酸鈉溶液和氯化鈣溶液流放到第二階反應(yīng)器，甘油經(jīng)滅菌后流加入第二階反應(yīng)器中，待甘油濃度在第二階反應(yīng)器中聚集到一定程度后，反應(yīng)器下部的壓力感應(yīng)裝置會控制閥門打開流出發(fā)酵液，發(fā)酵液經(jīng)過過濾網(wǎng)，濾去菌體及其他固體，后經(jīng)過濾膜，引出二羥基丙酮和甘油混合物；

2)從發(fā)酵液中提取二羥基丙酮

發(fā)酵液按10～100∶1(V/V)的比例濃縮，濃縮液上層析柱，采用陽離子交換樹脂，石油醚濕法裝柱，采用乙酸乙酯-丙酮混合溶劑為流動相，溫度為10～20℃，床層高徑比為15～50∶1，進(jìn)樣體積比為0.01～0.1BV，流速為0.1～0.8BV/h，收集二羥基丙酮片段，真空濃縮，得到二羥基丙酮粗品；將二羥基丙酮粗品溶于乙酸乙酯或丙酮中回流0.5～1h，將反應(yīng)液冷卻至0℃～-15℃，有晶體析出，經(jīng)過濾、真空干燥得到二羥基丙酮晶體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝方法，其特征在于：發(fā)酵菌株為葡萄牙棒孢酵母(Clavispora?lusitaniae)菌株G10，其菌種保藏編號為CGMCC?No.6414。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝方法，其特征在于：發(fā)酵菌株種子培養(yǎng)及的組成為：酵母粉1～7％(g/L)，蛋白胨0.2～6％(g/L)，(NH₄)₂SO₄?0.05～0.5％(g/L)，NH₂PO₄?0.01～0.05％(g/L)，MgSO₄?0.01～0.05％(g/L)，CaCO₃?0.01～0.05％(g/L)，其余為蒸餾水，pH值控制在4.0～7.0。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝方法，其特征在于：第一階反應(yīng)器和第二階反應(yīng)器指的是一個二階反應(yīng)器，其中第一階反應(yīng)器中主要用于菌株的繁殖與生長，第二階反應(yīng)器主要利用第一階反應(yīng)器中的菌懸液中的甘油脫氫酶氧化流加入的甘油，第二階反應(yīng)器下端連有壓力感應(yīng)器，待反應(yīng)器中的壓力超過一定數(shù)值后，底部控制閥門會自動打開，流出發(fā)酵液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝方法，其特征在于：甘油流入的流速為10～30L/h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用生物發(fā)酵法轉(zhuǎn)化甘油生存二羥基丙酮的工藝方法，其特征在于：海藻酸鈉溶液的添加量為1～10％，氯化鈣溶液為飽和氯化鈣溶液，其添加量為2～8％。