[發明專利]一種脂肪肉瘤鑒別診斷試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 201210357887.0
• 申請日: 2012-09-24
• 公開（公告）號: CN102994631A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 李明;何瑰;陳華云
• 申請（專利權）人: 中山大學達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10
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技術領域

本發明涉及一種利用DDIT3熒光探針制備的熒光原位雜交檢測的試劑盒，還涉及其DDIT3熒光探針的制備方法，本發明的DDIT3熒光探針及相應的試劑盒可用于脂肪肉瘤的鑒別診斷。?

背景技術

脂肪肉瘤(liposarcomas)是一種常見的惡性軟組織腫瘤，起源于脂肪母細胞向脂肪細胞分化的間葉細胞，故表現為不同分化程度的異型脂肪母細胞，均含有脂質。根據細胞成分的不同，脂肪肉瘤又可分為：①高分化脂肪肉瘤，也稱脂肪瘤樣脂肪肉瘤；②粘液型脂肪肉瘤；③圓細胞型脂肪肉瘤；④多形型脂肪肉瘤；⑤未分化型脂肪肉瘤，但腫瘤中通常是多型細胞混合存在。本病多見于30～70歲患者，以50歲左右發病最多。男性多于女性。四肢特別是大腿、臀部好發，上肢、腹膜后、頭、頸塊，直徑3～10cm多見，后腹膜巨大者直徑可達20cm以上，腫瘤常為結節狀，或分葉狀，質軟或稍硬。本病進展相對緩慢，很少發生轉移，手術切除可延長病人生命。分化型及粘液型脂肪肉瘤預后較好，5年生存率可達80％左右，多形型、圓細胞型、去分化型脂肪肉瘤預后差，5年生存率20％～50％。轉移以血行轉移為主，多轉移到肺。?

肉瘤分類與臨床預后和治療反應相關，對于患者的治療非常重要。尤因肉瘤(Ewing?sarcoma)和橫紋肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)對長春新堿/放線菌素D/環磷酰胺加異環磷酰胺/依托泊苷反應效果好。滑膜肉瘤對阿霉素和異環磷酰胺反應效果好，而黏液樣脂肪肉瘤(myxoid?liposarcoma)優先與trabectedine(ET-743，Yondelis，PharmaMar與Johnson&Johnson藥廠研發)反應。臨床需要將脂肪肉瘤與惡性纖維組織細胞瘤中的普通型和粘液型以及橫紋肌肉瘤中的多形型進行鑒別。一般認為惡性纖維組織細胞瘤，來源于未分化的間充質細胞，并分化為纖維細胞和組織細胞，是最常見的軟組織惡性腫瘤之一。橫紋肌肉瘤是軟組織肉瘤中惡性程度較高的，按多形性、胚胎性和腺泡性的順序惡性程度依次增高。橫紋肌肉瘤是小兒軟組織肉瘤中最多見的一種，占小兒惡性實體瘤的10％。橫紋肌肉瘤是20歲以下病人軟組織中最常見的肉瘤。目前進行脂肪肉瘤鑒別診斷主要依靠病理學診斷。但因大約10％的肉瘤處于低分化，依靠傳統的組織和免疫學方法無法分類，結果使患者很難得到最佳的治療。如，惡性纖維組織細胞瘤與多形性脂肪肉瘤的鑒別診斷，后者無分層改變，但有成脂細胞和脂細胞的分化。在惡性纖維組織細胞瘤中也可能存在胞漿內空泡，但在成脂細胞中，空泡能向細?胞核和周圍轉移，并使核變平，另外，在惡性纖維組織細胞瘤細胞形成的空泡中含有粘多糖物質。由于兩種腫瘤(前者和多形性脂肪肉瘤)的脂質染色均為陽性，故對鑒別診斷無任何意義。手術中橫紋肌肉瘤的形態無明顯特征，很像高度軟組織肉瘤。隨著分子技術的發展，在軟組織腫瘤中已經鑒別出許多遺傳改變，這成為了腫瘤輔助診斷和分類的新的生物標志物，對于靶向治療也產生積極意義。[AD?Singhi，EA?Montgomery.Liposarcomas.Surgical?Pathology?Clinics，Volume?4，Issue?3，Pages?963-994；Aatur?D.Singhi，Elizabeth?A.MontgomeryKrikelis?D，Judson?I.Role?of?chemotherapy?in?the?management?of?soft?tissue?sarcoma.Expert?RevAnticancer?Ther.2010；10：249-60.PMID：20132000.doi：10.1586/era.09.176；Grier?HE，Krailo?MD，Tarbell?NJ?et?al.Addition?of?ifosfamide?and?etoposide?to?standard?chemotherapy?for?Ewing′s?sarcoma?and?primitive?neuroectodermal?tumor?of?bone.N?Engl?J?Med.2003；348：694-701：Ruymann?FB，Grovas?AC.Progress?in?the?diagnosis?and?treatment?of?rhabdomyosarcoma?and?related?soft?tissue?sarcomas.Cancer?Invest.2000；18：223-41；Sleijfer?S，Ouali?M，van?Glabbeke?M?et?al.Prognostic?and?predictive?factors?for?outcome?to?first-line?ifosfamide-containing?chemotherapy?for?adult?patients?with?advanced?soft?tissue?sarcomas：An?exploratory，retrospective?analysis?on?large?series?from?the?European?Organization?for?Research?and?Treatment?of?Cancer-Soft?Tissue?and?Bone?Sarcoma?Group(EORTC-STBSG).Eur?J?Cancer.2010；46：72-83；Alffedo?L.Valente，Jamie?Tull，Shengle?Zhang.Utility?of?fluorescence?in?situ?hybridization?in?sub-classifying?unclassified?high-grade?sarcomas：A?study?of?40cases?using?break-apart?probes?of?EWSR1，FOXO1A，SS18?andDDIT3?genes.Journal?of?Solid?Tumors，April?2012，Vol.2，No.2：4-9]?