[發明專利]一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物及提取方法

無效

• 申請號: 201210357812.2
• 申請日: 2012-09-24
• 公開（公告）號: CN102824463A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 許惠琴;趙曉莉;趙騰斐;狄留慶;農偉虎;呂高虹;崔小兵
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/804
• 分類號: A61K36/804;A61P3/10;A61P9/14
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本發明涉及一類中藥提取物，特別是涉及用于一類抑制體外糖基化產物生成中藥提取物及提取方法和應用。?

背景技術

糖尿病在中醫學上屬于“消渴證”范疇。糖尿病血管病變是糖尿病的主要并發癥，其大血管病變性質為動脈粥樣硬化，主要累及主動脈、冠狀動脈等大血管，而糖尿病的微血管病變是糖尿病特有的慢性血管并發癥，主要表現為視網膜、腎等微血管病變。臨床統計表明，40％－50％的糖尿病患者在發病10年后發生視網膜病變；約有2％的患者在發病15年后完全失明；5％~10％的患者在發病20年后惡化成終末期腎病。雖然糖尿病腎病發生發展的確切病理機制目前尚不十分詳盡，主要有非酶糖化學說、多元醇通路學說、蛋白激酶C激活學說、氧化應激等。但比較公認的假說是在長期高血糖狀態下，葡萄糖分子可與體內蛋白質發生非酶糖基化反應，形成不可逆的強活性物質—晚期糖基化終產物(AGEs)的結果。AGEs的生成是正常體內存在的一種自然化學反應，即氨基酸和還原糖生成穩定的Amadori產物，這一反應由Maillard在1912年首次發現，稱為Maillard反應。Maillard反應發生在體外或體內蛋白質等物質的氨基與糖的醛基上，不需酶的催化，但是一個極為復雜的過程。首先蛋白質分子和糖類發生縮合反應，生成不穩定的薛夫堿（Shiff?bases），而后薛夫堿可發生分子內的重排而生成較為穩定的阿馬多里（Amadori）重排產物。上述兩步反應均為可逆性反應，生成的產物稱為早期糖基化產物。此后該產物緩慢地經過一系列脫水、氧化及化學重排，產生高度活性的羰基化合物，如3-脫氧葡萄糖酮醛（3-deoxyglucosone,3-DG），進而與蛋白質的自由氨基起反應，凝聚形成不可逆的終末產物，稱之為晚期糖基化終產物（AGEs）。中醫認為內熱是消渴病發生發展的始動因素，進一步可以傷陰導致腎陰虛，最后陰損及陽，而成陰陽俱虛之證。陰虛熱盛貫穿糖尿病腎病的始末，尤多見于糖尿病腎病重癥患者。而糖尿病腎病的西醫病因病機研究發現AGEs是導致糖尿病腎病變的主要病因，AGEs的直接損傷作用以及通過RAGE信號通路引起的腎臟病變是糖尿病腎病發生發展的主要病理基礎。故尋找藥物直接抑制中醫認為的“內熱”物質基礎——AGEs的生成是控制糖尿病血管病變的有效途徑。?

發明內容

發明目的：本發明的目的在于提供一類抑制體外糖基化產物生成中藥提取物及提取方法和應用。?

技術方案：?

一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物，其特征在于該中藥提取物為生地2份和山茱萸1份的分煎水提物、合煎水提物、水提含藥血清或水提醇沉有效部位。?

所述的一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物，其特征在于分煎水提物的提取方法，包括以下步驟：各取生地2份、山茱萸1份，每次按4-12倍量加入蒸餾水后，分別提取2-4次，分別濃縮，按生地：山茱萸=2：1混合均勻，得生地山茱萸分煎水提物。?

所述的一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物，其特征在于合煎水提物的提取方法，包括以下步驟：取生地、山茱萸藥材以2：1的比例混合均勻，加入8-12倍量蒸餾水后，反復提取2~4次，提取1-2h，合并提取液、濃縮，得生地山茱萸合煎水提物。?

所述的一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物，其特征在于，生地、山茱萸分煎和合煎水提液的含藥血清提取方法，首先制備生地山茱萸分煎和合煎水提物；然后，選取SD大鼠，將生地山茱萸分煎和合煎水提物給大鼠灌胃，連續給藥5-7天后，禁食，于末次給藥1-2小時后取血，3000rpm離心10-20min，分離血清，于56℃水浴中滅活補體20-40min，經0.22μm微孔濾器除菌，-20℃保存備用，即得生地、山茱萸分煎和合煎水提物含藥血清。?

所述的一類抑制體外糖基化產物生成的中藥提取物，其特征在于生地水提醇沉有效部位的提取方法，包括以下步驟：將生地粉碎，每次4-10倍量水提1-2h，合并提取液，加70%乙醇醇沉，靜置過濾得上清液和醇沉物，上清液揮至無醇味，上大孔樹脂，用蒸餾水洗脫，得寡糖部位；上清液繼續用30%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，得環烯醚帖苷部位；醇沉物加蒸餾水溶解，離心后取上清液，并揮至無醇味，得多糖部位。?