[發明專利]流腦多糖-蛋白質綴合疫苗及制備方法

無效

• 申請號: 201210351607.5
• 申請日: 2012-09-19
• 公開（公告）號: CN102861326A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 朱濤;宇學峰;劉正;邵忠琦;毛慧華;邱東旭
• 申請（專利權）人: 天津康希諾生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/095
• 分類號: A61K39/095;A61K39/385;A61K47/48;A61P31/04
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

1.流腦多糖-蛋白質綴合疫苗，其特征是用[S-C]n-[N-P]m表示，其中S表示一種流腦多糖分子，C表示該流腦多糖分子中引入醛基的C原子，P表示CRM197蛋白分子，N表示該蛋白分子中賴氨酸側鏈氨基的N原子；n和m大于1且小于10；所述S的分子量>100KD；所述[S-C]n-[N-P]m的平均分子量在200KD到2000KD之間，所述流腦多糖為W-135型和Y型流腦多糖中的至少一種，所述流腦多糖為奈瑟氏腦膜炎球菌莢膜多糖的簡稱。

2.根據權利要求1所述的流腦多糖-蛋白質綴合疫苗，其特征是所述[S-C]n-[N-P]m的平均分子量在200KD到700KD之間。

3.多價流腦多糖-蛋白質綴合疫苗，其特征是包括權利要求1或2流腦多糖-蛋白質綴合疫苗，還包括A型流腦多糖與載體蛋白結合的綴合物和C型流腦多糖與載體蛋白結合的綴合物。

4.流腦多糖-蛋白質綴合疫苗的制備方法，其特征是包括如下步驟：

（1）將純化的流腦多糖溶解于水或乙酸鈉緩沖液中，按照流腦多糖與高碘酸鹽質量比為1：0.02-0.2的比例加入高碘酸鹽，活化反應后，超濾或透析去除未反應的高碘酸鹽，使流腦多糖上相鄰的雙羥基被氧化成醛基，得到引入醛基的活化流腦多糖；

（2）按質量比為0.5-3：1的比例將步驟（1）獲得的所述活化流腦多糖和純化的載體蛋白CRM197溶解于磷酸鹽緩沖液中，調節pH到6.5和8.5之間，以氰基硼氫化鈉:醛基摩爾比5-10的比例加入氰基硼氫化鈉進行還原胺反應18-48小時，使活化流腦多糖的醛基和CRM197表面賴氨酸上的氨基產生聯接；

（3）加入硼氫化鈉封閉活化流腦多糖上未反應的醛基；通過硫銨沉淀或者疏水柱層析的方法去除未與載體蛋白CRM197產生反應的游離流腦多糖，得到純化的流腦多糖-蛋白質綴合疫苗；所述流腦多糖血清型為W-135和Y至少一種，所述流腦多糖為奈瑟氏腦膜炎球菌莢膜多糖的簡稱。

5.根據權利要求1，2或3所述的疫苗，其特征是還包括佐劑。

6.根據權利要求5所述的疫苗，其特征是所述佐劑選自鋁佐劑、弗氏佐劑、單磷酰脂A、CpG、QS-21、霍亂毒素或甲酰甲硫氨酰肽。

7.根據權利要求6所述的疫苗，其特征是所述鋁佐劑為磷酸鋁或氫氧化鋁。

8.根據權利要求1，2或3所述的疫苗，其特征是還包含藥學可接受的防腐劑。

9.根據權利要求8所述的疫苗，其特征是所述防腐劑選自芐醇、對羥苯甲酸酯、硫柳汞、氯代丁醇或苯扎氯銨。