[發明專利]冬凌草納米微粒的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201210348703.4
• 申請日: 2012-09-19
• 公開（公告）號: CN102824405A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 曾智平;華健
• 申請（專利權）人: 華健
• 主分類號: A61K36/53
• 分類號: A61K36/53;A61K9/14;A61P19/10
• 代理公司: 東莞市中正知識產權事務所 44231
• 代理人: 肖哲

1.一種冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將冬凌草與去離子水或無水乙醇中的一種或兩種組合溶劑按1:1～20混合后，在回流提取溫度為70℃～95℃下回流提取30min～300min，趁熱過濾，得到濾渣和濾液；

（2）將步驟（1）得到的濾液在60℃~90℃的條件下進行減壓蒸餾濃縮至原體積的1/2～1/10；

（3）將步驟（2）得到的濃縮濾液進行脫色、脫蛋白質處理，然后將處理液用95%乙醇調節至溶液中乙醇濃度為50%~60%，低溫靜置12~24小時，離心分離得到沉淀物和上清液；

（4）將沉淀物用10~50倍的去離子水充分溶解，然后上凝膠柱進行層析，用超純水洗脫，洗脫速度為0.1ml~1.0ml/min，用紫外分光光度法進行跟蹤并收集洗脫液；

（5）將步驟（4）的洗脫液與超臨界CO₂抗溶劑系統的液體泵相連；

（6）啟動超臨界CO₂抗溶劑系統，結晶釜的溫度為40℃~80℃，結晶釜的壓力為8Mpa~50Mpa，CO₂的流量為30~300L/hr；

（7）啟動超臨界CO₂抗溶劑系統的夾帶劑泵和步驟（4）中的液體泵，洗脫液與甲醇、乙醇、乙酸乙酯或丙酮中的一種夾帶劑的進料比為10:1~1:10，洗脫液與夾帶劑先混合后，經超臨界CO₂抗溶劑系統的納米噴嘴噴入結晶釜中，流量控制在100ml~1000ml/hr；洗脫液中的溶劑和夾帶劑進入分離釜中解析并分離，洗脫液中的溶質在結晶釜內析出為微細顆粒，該微細顆粒即為冬凌草納米微粒。

2.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（7）中的納米噴嘴的口徑為1～100nm。

3.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的分離釜溫度為35℃～60℃，分離壓力為4Mpa～7Mpa。

4.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的分離釜溫度為50℃，分離壓力為5Mpa。

5.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的CO₂氣體的純度不低于99%。

6.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的凝膠柱層析所用的填料為葡聚糖凝膠系列、瓊脂糖凝膠系列或丙烯葡聚糖凝膠系列中的一種。

7.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于將步驟（3）離心得到的上清液用95%乙醇調節至溶液中乙醇濃度為60%~70%，低溫靜置12~24小時，離心分離得到沉淀物II和上清液；將上述離心得到的上清液用95%乙醇調節至溶液中乙醇濃度為70%~80%，低溫靜置12~24小時，離心分離得到沉淀物III和上清液；再將上述離心得到的上清液用95%乙醇調節至溶液中乙醇濃度為80%~90%，低溫靜置12~24小時，離心分離得到沉淀物IV；將上述得到的沉淀物II、沉淀物III和沉淀物IV與步驟（3）中得到的沉淀物合并。

8.根據權利要求1所述的冬凌草納米微粒的制備方法，其特征在于將步驟（1）濾渣重復步驟（1）操作1次，合并濾液。

9.一種如權利要求1所述的制備方法制備的冬凌草納米微粒在防治骨質疏松癥方面的應用。

10.一種如權利要求1所述的制備方法制備的冬凌草納米微粒在制備防治骨質疏松癥方面藥物中的應用。