[發明專利]具有抗交聯作用的水溶性膠原蛋白無效
| 申請號: | 201210347724.4 | 申請日: | 2012-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN102864118A | 公開(公告)日: | 2013-01-09 |
| 發明(設計)人: | 畢宏偉;謝磊 | 申請(專利權)人: | 天津市賽寧生物工程技術有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/00 | 分類號: | C12N5/00;A61L27/24;A61L27/00;A61K8/65 |
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| 地址: | 300384 天津市西青區華苑產業區*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 具有 交聯 作用 水溶性 膠原 蛋白 | ||
技術領域
本發明涉及一種用于細胞培養、組織工程和化妝品領域的水溶性膠原蛋白,其主要成份是水溶性膠原蛋白和抗氧化劑組成,外觀為凍干海綿。
背景技術
膠原蛋白是一種多細胞動物產生的細胞外基質成份之一。隨著組織工程的發展,被廣泛地用于組織培養、醫用材料等領域,常見的I型膠原蛋白為非水溶性膠原,目前市場上常見的水溶性膠原其實是I型膠原降解為多肽后形成的膠原肽,人們在胎牛和犢牛皮中也提取出完全不同于I型膠原的未變性的水溶性膠原,但是由于其特殊的空間結構所產生的分子間力的作用極易產生交聯而轉化為不溶于水的膠原蛋白,保存期極短,以至于無法大量地應用于實驗和生產過程中。本方法利用抗氧劑的獨特作用,減小水溶性膠原分子結構中分子間力的作用,從而達到克服其產生交聯的性質,延長保存期,改善保存效果,增加水溶性膠原的穩定性。
發明內容
本材料選用了市售的水溶性膠原與抗氧化劑復合而成:
1、水溶性膠原溶液的制備:取一定量市售的、未變性且存放期不超過一周的水溶性膠原,溶于去離子水中,攪拌溶解成均勻的質量體積比濃度為0.1%~0.5%的膠原膠液。
2、抗氧化劑水溶液的制備:市售維生素C、花青素、茶多酚、茄紅素溶于去離子水,攪拌溶解成質量體積比濃度為5%~10%的抗氧化劑水溶液。
3、將(1)中所述溶液放入透析袋中,用(2)中的抗氧化劑水溶液做透析外液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
具體實施方式
實施例1、
取市售水溶性膠原溶液100mg,加入1000ml去離子水中,攪拌溶解成質量體積比濃度為0.1%的膠原溶液。維生素C50g溶于1000ml去離子水中,制成質量體積比濃度為5%的抗氧化劑溶液,該溶液現用現制,用抗氧化劑溶液做透析外液對膠原溶液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
實施例2、
取市售水溶性膠原溶液500mg,加入1000ml去離子水中,攪拌溶解成質量體積比濃度為0.5%的膠原溶液。花青素100g溶于1000ml去離子水中,制成質量體積比濃度為10%的抗氧化劑溶液,該溶液現用現制,用抗氧化劑溶液做透析外液對膠原溶液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
實施例3、
取市售水溶性膠原溶液200mg,加入1000ml去離子水中,攪拌溶解成質量體積比濃度為0.2%的膠原溶液。茶多酚70g溶于1000ml去離子水中,制成質量體積比濃度為7%的抗氧化劑溶液,該溶液現用現制,用抗氧化劑溶液做透析外液對膠原溶液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
實施例4、
取市售水溶性膠原溶液400mg,加入1000ml去離子水中,攪拌溶解成質量體積比濃度為0.4%的膠原溶液。茄紅素80g溶于1000ml去離子水中,制成質量體積比濃度為8%的抗氧化劑溶液,該溶液現用現制,用抗氧化劑溶液做透析外液對膠原溶液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
實施例5、
取市售水溶性膠原溶液300mg,加入1000ml去離子水中,攪拌溶解成質量體積比濃度為0.3%的膠原溶液。花青素60g溶于1000ml去離子水中,制成質量體積比濃度為6%的抗氧化劑溶液,該溶液現用現制,用抗氧化劑溶液做透析外液對膠原溶液進行透析,透析溫度2~8℃,每4小時換一次透析外液,透析72小時,透析物5000rpm,2~8℃條件下離心10min,取上清液冷凍干燥成型。
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