[發(fā)明專利]用于基因傳遞的具有增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的全氟化碳納米乳液

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210345209.2
• 申請日: 2009-05-13
• 公開（公告）號: CN102847170A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S.施賴伯
• 申請（專利權(quán)）人: 塞爾聞緹斯集團(tuán)
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K9/107;A61K47/04;A61K47/24
• 代理公司: 北京尚誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳;李巍

本申請是申請日為2009年5月13日，發(fā)明名稱為“用于基因傳遞的具有增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的全氟化碳納米乳液”的中國專利申請第200980118149.7號的分案申請。?

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明在于提供穩(wěn)定的適合用于基因傳遞的全氟化碳納米乳液、其制備和應(yīng)用。?

背景技術(shù)

常規(guī)的寡核苷酸和近年來的短干擾RNA是有希望用于基因傳遞的并被廣泛使用的物質(zhì)。至今，將該遺傳物質(zhì)應(yīng)用于活體動物的可能性是非常有限的。?

對于遺傳物質(zhì)的遞送，全氟化碳(PFC)乳液成功地用作氧轉(zhuǎn)運(yùn)體，因此這些乳液是一種有前途的工具(Daugherty,W.P.,等,Neurosurgery54:1223-1230(2004);Riess,J.G.,Artif.Cells?Blood?Substit.Immobil.Biotechnol.33:47-63(2005))。在氣管內(nèi)應(yīng)用后，常規(guī)的全氟化碳乳液可以將藥物運(yùn)輸至肺(Dickson,E.W.等,Acad.Emerg.Med.10:1019-1023(2003))。此外，PFC乳液具有通過呼氣安全清除的優(yōu)勢(Putyatina,T.K.等,Artif.Cells?Blood?Substit.Immobil.Biotechnol.22:1281-1285(1994))。?

因此，全氟化碳可以作為用于將遺傳物質(zhì)遞送至活體動物的有效和安全的工具而發(fā)揮作用。由于其作為氧轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能，常規(guī)的PFC-乳液具有的尺寸阻止其離開血管床并且因此上述乳液將不能夠?qū)⑽镔|(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)至活生物體的細(xì)胞中。?

過去幾年中，已經(jīng)提出了幾種不太有效的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，例如，結(jié)合膽固醇或由載脂蛋白A介導(dǎo)至肝內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)體(Kim,S.I.等，A-I.Mol.Ther.15:1145-1152(2007))。?

EP-B-0788347公開了平均直徑為至多10nm的含有水滴的油包水?氟碳化合物乳液的制備。將氟化的表面活性劑或含有至少一種氟化的表面活性劑的表面活性劑混合物用作乳化劑。?

EP-A-1844772公開了一種用于以寡核苷酸轉(zhuǎn)染細(xì)胞的組合物，其中乳化劑是具有C₁₀-C₃₆烴或氟碳鏈的咪唑鎓衍生物。?

EP-B-00831770公開了含有攜帶藥物活性化合物的不連續(xù)相的氟化化合物的連續(xù)微分散體。US?2004/0115159公開了一種水包油納米乳液，其由表面活性物質(zhì)的三元體系組成，適合作為用于化妝品和藥劑的轉(zhuǎn)運(yùn)劑。此三元體系含有陰離子、陽離子和兩親性表面活性劑。?

US?7211248公開了用DNA轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞的方法，其中超聲造影劑補(bǔ)充以帶有質(zhì)粒DNA的蛋白穩(wěn)定微粒。轉(zhuǎn)染通過肝細(xì)胞的超聲作用來實現(xiàn)。?

US?2007/0184076公開了一種納米液滴混合物，其由氟碳化合物和例如抗癌劑的治療活性物質(zhì)的生物學(xué)可接受的油混合物組成。?

US?2006/0013820公開了一種組合物，其含有多種氟碳化合物、適合作為治療劑的抗原和任選地含有其他的藥物載體。該組合物據(jù)說適合作為疫苗，尤其用于治療HIV。?

WO?96/40057、WO?96/40053和EP-A-1306083公開了作為治療活性物質(zhì)的載體的穩(wěn)定的全氟化碳(納米)乳液。?

US?6071890公開了在體內(nèi)負(fù)載DNA和RNA的轉(zhuǎn)運(yùn)體和還負(fù)載生物學(xué)活性化合物的兩親性陽離子物質(zhì)。這些物質(zhì)與類固醇結(jié)合。?

WO?01/722812公開了一種作為轉(zhuǎn)染劑的微粒，其含有聚合物質(zhì)、生物學(xué)活性治療因子和脂蛋白。?

仍然需要用于在生物體中基因傳遞的可靠的轉(zhuǎn)運(yùn)載體。?

發(fā)明的概述?

目前發(fā)現(xiàn)具有增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的全氟化碳納米乳液、特別是含有作為乳化劑的磷脂的具有增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的全氟化碳納米乳液，適合于在體內(nèi)施用遺傳物質(zhì)。添加為納米乳液提供增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的分子，顯著地增加細(xì)胞對全氟化碳納米乳液的攝取。因此，本發(fā)明在于提供?

(1)一種穩(wěn)定的具有增強(qiáng)內(nèi)吞作用的表面的全氟化碳納米乳液；?

(2)上述(1)的優(yōu)選實施方式，其中上述納米乳液具有連續(xù)的全氟化碳相和緩沖的不連續(xù)水相，并且含有?

(a)全氟化碳組分，其含有至少一種全氟化碳化合物；?

(b)乳化組分；和?

(c)增強(qiáng)內(nèi)吞作用的組分，其含有至少一種通過內(nèi)吞作用誘導(dǎo)細(xì)胞攝取上述納米乳液的化合物；?