[發(fā)明專利]一種芡實(shí)蛋白及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210343409.4
• 申請日: 2012-09-17
• 公開（公告）號: CN102863522A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 齊斌;王立梅;朱益波
• 申請（專利權(quán)）人: 常熟理工學(xué)院
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C07K1/30
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務(wù)所 32230
• 代理人: 徐蓓

1.一種芡實(shí)蛋白的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

（1）制備芡實(shí)果仁漿液；

（2）用堿性pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)芡實(shí)果仁漿液的pH值，震蕩提取，得到芡實(shí)蛋白的堿浸提液；

（3）將芡實(shí)蛋白的堿浸提液離心，分離上清液和沉淀；

（4）取上清液透析，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)透析液pH值，靜置，離心，取沉淀，加入蒸餾水，攪拌均勻得到芡實(shí)蛋白分散液；

（5）用堿性pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)芡實(shí)蛋白分散液的pH值，冷凍干燥，得芡實(shí)蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，步驟（1）為：取新鮮的芡實(shí)果仁，加入NaCl溶液浸泡溶脹后，粉碎打漿，過150-250目篩，即得芡實(shí)果仁漿液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，所述NaCl溶液的體積為芡實(shí)果仁質(zhì)量的6-12倍，NaCl溶液濃度為0.1-1.0mol/L，其中含0.02-0.08%亞硫酸鈉，室溫下浸泡時間為1-2h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，所述步驟2為：用0.2-0.8mol/L的氫氧化鈉溶液將芡實(shí)果仁漿液的pH值調(diào)節(jié)至7-10，室溫下震蕩提取1-2h，震蕩頻率為30-4500r/min，得到芡實(shí)蛋白的堿浸提液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，步驟（3）所述的離心為25℃下，以2500-4000r/min的速度離心10-30min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，步驟（4）所述的透析使用大小為MWCO:8000-12000Da的透析袋，2-6℃下透析64-86h，所述鹽酸溶液濃度為0.8-1.2mol/L，上清液的pH值調(diào)節(jié)至5.8-6.15，靜置時間為2-4h，所述離心為2-6℃下，以8000-12000r/min的速度離心10-30min，離心后得到的沉淀加入蒸餾水的質(zhì)量為沉淀質(zhì)量的2-5倍。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，步驟（5）中所述的堿性pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉溶液，所述氫氧化鈉溶液濃度為0.2-0.8mol/L，將芡實(shí)蛋白分散液的pH值調(diào)節(jié)至7-8。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，步驟（5）中所述的冷凍干燥的凝冰溫度為?-54℃?，冷阱室內(nèi)冷凍的擱板溫度為?-20℃。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芡實(shí)蛋白制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

（1）取新鮮的芡實(shí)果仁，加入體積為芡實(shí)果仁質(zhì)量8倍的NaCl溶液室溫浸泡溶脹1.5h后，粉碎打漿，過200目篩，即得芡實(shí)果仁漿液；所述NaCl溶液濃度為0.5mol/L，其中含0.05%亞硫酸鈉；

（2）用0.5mol/L的氫氧化鈉溶液將芡實(shí)果仁漿液的pH值調(diào)節(jié)至8.5，室溫下震蕩提取1.5h，得到芡實(shí)蛋白的堿浸提液；

（3）將芡實(shí)蛋白的堿浸提液在25℃下，以3200r/min的速度離心20min，分離上清液和沉淀；

（4）取上清液入MWCO:10000Da的透析袋，4℃下透析72h，用1.0mol/L的鹽酸溶液將上清液的pH值調(diào)節(jié)至6.0，靜置3h，在4℃下，以10000r/min的速度離心20min，取沉淀，加入沉淀質(zhì)量的3.5倍的蒸餾水，攪拌均勻得到芡實(shí)蛋白分散液；

（5）用0.5mol/L的氫氧化鈉溶液將芡實(shí)蛋白分散液的pH值調(diào)節(jié)至7.5，冷凍干燥，得芡實(shí)蛋白。

10.權(quán)利要求1-9任一項芡實(shí)蛋白制備方法所得的芡實(shí)蛋白。