[發明專利]中成藥中人參DNA的PCR檢測方法有效
| 申請號: | 201210338707.4 | 申請日: | 2012-09-13 |
| 公開(公告)號: | CN102827940A | 公開(公告)日: | 2012-12-19 |
| 發明(設計)人: | 唐卓;陳蓉 | 申請(專利權)人: | 中國科學院成都生物研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 成都賽恩斯知識產權代理事務所(普通合伙) 51212 | 代理人: | 張帆;肖國華 |
| 地址: | 610041 四川*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 中成藥 人參 dna pcr 檢測 方法 | ||
1.一種中成藥中人參DNA的PCR檢測方法,其特征在于,所述方法是利用PCR擴增中成藥中人參特異性的DNA來檢測中成藥中的人參DNA。
2.根據權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:所檢測中成藥為含有拉丁學名為Panax?ginseng?C.A.Mey.、其別名或其炮制品的中成藥。
3.根據權利要求1或2所述的檢測方法,其特征在于,所述方法包括下列步驟:
1)中成藥中人參DNA的提取;
2)PCR反應;
3)PCR擴增產物分析。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,步驟1)中對于中成藥藥材以藥材粉末入藥的劑型采用改良的CTAB法提取DNA;對于中成藥藥材以提取液入藥的劑型采用乙醇重結晶的方法提取。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,其中所述的藥材粉末入藥的劑型包括片劑、膠囊和丸劑;所述的提取液入藥的劑型包括口服液和注射液。
6.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,對于DNA含量較高的樣本采用普通PCR,對于DNA含量較低的樣本采用巢式PCR。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述的普通PCR反應的正向引物和反向引物是以人參ITS2序列區域為模板設計的特異性引物,其目的條帶可在80-224bp。
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述的巢式PCR對總基因組DNA依次進行第一輪PCR和第二輪PCR兩次擴增,第一輪PCR擴增產物的DNA片段可在700-1500bp,第二輪PCR與普通PCR相同。
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