[發明專利]藥用猴頭菌菌絲體固體液體混合培養的方法

有效

• 申請號: 201210332845.1
• 申請日: 2012-09-11
• 公開（公告）號: CN102823428B
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 史長山;姜存敏;潘志明;王俊俊
• 申請（專利權）人: 史長山
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種藥用猴頭菌菌絲體固體液體混合培養的方法，包括以下步驟：下 述物質的百分數均為重量百分數，

(1).配制固體培養基

加入余量的水，pH值6～7.5，混合均勻，118～121℃滅菌，25～30分 鐘；

(2).菌種的優化篩選及子實體分離；

采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長強壯、發育良好、沒有病蟲 害、種子沒散落的子實體；

在接種室100級以上超凈工作臺內，將猴頭菇子實體浸入75％的酒精中 消毒1～2分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實體放 在培養皿上，用鐘形罩用具覆蓋，室溫保持在18～20℃，使子實體緩慢生長， 過2～3天后，種子即散出來，落入裝有步驟(1)培養基的培養皿中，然后用鑷 子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養，在22～25℃下培養 4～5天種子即會萌發，待菌絲基本長滿斜面時，選擇色白、基內菌絲發達粗 壯、菌束明顯的，置入搖床瓶接種備用；

(3).菌種的培養

接種前，接種口應先用常規方法消毒，即用75％酒精浸泡過的脫脂棉球 擦試，后開啟臭氧發生器，使其出風口始終對著接種口，在接種口周圍形成 一個局部無菌區，然后用消過毒的無毒橡膠管套于接種管口上，將經過孢子 分離的搖床瓶菌種接入裝有步驟(1)培養基的罐內，接種量為9％～11％，全部 過程均在無菌條件下進行，接種后開攪拌機，攪拌速度200轉/分，恒溫25 ℃，培養2天；

(4).液體深層培養：

4.1種子罐培養基為：

加入余量的水，118～121℃滅菌28～32分；

4.2將步驟(3)培養好的菌種接種至種子罐，25～27℃，培養3～4天， 至結果為：

①.鏡檢：菌絲呈樹枝狀，無雜菌；

②.外觀：液體中有較多的白球狀粒；

(5).菌絲體培養：

麩皮40％，甘草藥渣20％，延胡索藥渣10％，玉米面10％，谷糠10％，玉 米棒5％，木屑5％；加水混勻，再加入總量的1％的石膏，攪拌均勻，分裝在 聚丙烯小袋中，118～121℃滅菌115～120分鐘，在100級無菌區中接入步驟 4.2的固體菌種，接種量為1/30，前12天26～28℃，后28天在23～25℃中 培養，待菌絲生長滿后掰塊55～65℃烘干，即得猴頭菌絲體。