[發(fā)明專利]一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法

無效

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• 申請日: 2012-09-07
• 公開（公告）號: CN102792912A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設計）人: 楊健;劉洪波;姜濤
• 申請（專利權）人: 中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 殷紅梅

技術領域

本發(fā)明涉及一種利用耳石微量元素判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，屬于魚類生態(tài)學領域。

背景技術

棘頭梅童魚是近海小型經(jīng)濟魚類，主要分布于中西太平洋區(qū)的南海、東海和黃渤海，是我國、菲律賓、印尼、日本和朝鮮等國家沿海、河口水域重要的漁業(yè)資源和主要的經(jīng)濟魚類之一。近年來由于過度捕撈和環(huán)境污染等因素的影響，棘頭梅童魚的年平均資源密度在大幅下降，資源開發(fā)率過高。其魚卵仔魚資源補充量已受到衰竭的威脅，而全人工育苗技術至今尚未成熟。近些年來由于價格不斷攀升，棘頭梅童魚已經(jīng)成為一種高經(jīng)濟價值的水產(chǎn)品。毫無疑問，準確了解棘頭梅童魚的資源動態(tài)及其與環(huán)境因子的關系，對揭示棘頭梅童魚生活史過程所需環(huán)境條件、生境規(guī)律，加強保護和優(yōu)化全人工繁殖的環(huán)境技術等具有非常重要的意義。

迄今，通過漁獲調查法對棘頭梅童魚的生境及活動規(guī)律已經(jīng)有了認識。它的分布區(qū)一般在河口（如長江、飛云江、閩江、珠江），有在深淺水間洄游的現(xiàn)象。資源密度的變化存在季節(jié)性且隨鹽度增加而降低。產(chǎn)卵多在大潮水的幾天里。卵的浮性及個體發(fā)育依賴海水的鹽度等條件。然而，由于研究技術的限制，要確切而直觀地把握棘頭梅童魚從孵化到幼魚直至成魚全生活史過程中的洄游、生境差異，群體組成規(guī)律，以及不同河口水域棘頭梅童魚種群特征及相關性等尚有很大的難度。

研究發(fā)現(xiàn)，由于不同水環(huán)境之間的元素成分會有很大的差異，魚類從水環(huán)境中吸收的元素可以在硬組織如耳石中沉積并長期保存。因此，伴隨著不同的生活和洄游履歷，硬組織中元素的積累可留下棲息水環(huán)境中元素特征的

“指紋”。相應地如果能利用諸如元素衍射電子探針分析（EPMA）等較為先進的技術對這些“指紋”進行歸納總結，就有可能恢復、重現(xiàn)和掌握大量洄游性魚類生態(tài)學、生理學等方面的信息及其時空變化過程。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種新的利用耳石微量元素判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和洄游生活史的方法，通過將耳石分離、磨拋等前處理以及元素衍射電子探針分析操作等一系列步驟，測定棘頭梅童魚耳石中Sr、Ca元素的濃度值，并將這些濃度值歸納出不同生境的微量元素地理“指紋”特征，并利用這些特征來進行棘頭梅童魚產(chǎn)地和洄游生活史判別。鍶含量/鈣含量×10³的比值連續(xù)出現(xiàn)三次及以上大于7時可判定為高鹽度生活階段；比值在3～7之間時為半咸水生活階段；比值在0～3之間時為低鹽度或淡水生活階段。該方法所取得的結果穩(wěn)定性好，可重復性高、系統(tǒng)誤差小，可判別性強，顯示出了其快速的優(yōu)勢。

按照本發(fā)明提供的技術方案，一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，采用以下工藝步驟：

1、捕撈不同水域的棘頭梅童魚，立刻放入清潔的塑料自封袋中并在0～4℃保存，在此溫度條件下盡快運回實驗室保存；

2、野外采集并運回實驗室保存的棘頭梅童魚完整個體樣本轉移于-18～-20℃冰箱內保存，待用；

3、棘頭梅童魚耳石樣本前處理方法：

(1)、取出左或右側矢耳石，經(jīng)超純水洗清除表面的有機質，清洗干凈后，室溫下晾干、干燥保存作為分析的材料待用；

(2)、用上海艾立熱熔膠棒廠生產(chǎn)含重量百分含量的聚氨酯膠成分>25%的熱熔膠將其較平滑的面固定在載玻片上，等熱熔膠冷卻10～15分鐘變硬后先將耳石在500目水砂紙上進行粗磨，并隨時在正置金相顯微鏡上用透反射光觀察表面狀況，待首次觀察到輪紋時換用1200目水砂紙細磨2～5分鐘使表面平滑，然后用酒精燈將熱熔膠熔化后取出耳石；

(3)、將未磨過的光面耳石用雙面膠將其固定在鑲樣模內，做好樣本標簽，將冷鑲嵌用透明的環(huán)氧樹脂和硬化劑（司特爾公司,哥本哈根,丹麥）按照5:1的比例調勻后，往每個鑲樣模內注入3～4ml混合樹脂，將耳石包埋于其中。放入40℃～45℃的干燥箱中烘12小時～15小時至完全固化；

(4)、取出鑲樣模內包埋有耳石的固化樹脂塊，選用500目水砂紙對未磨過的光面耳石進行粗磨，待粘在耳石上的雙面膠全部磨掉后換用1200目水砂紙進行精磨，期間隨時在金相顯微鏡上觀察表面狀況，用透反射光確認磨至核心后，將樹脂塊洗凈待用；

(5)、使用金剛石拋光液和MD拋光布以120～150rpm的轉速在拋光機上（司特爾公司,哥本哈根,丹麥）拋光3～5分鐘至耳石表面無刮痕為止。將所有拋光的樹脂塊放入超純水（美國密理博公司，Milliprore-Simplicity個人型超純水系統(tǒng)，出水電阻率18.2MΩ.cm）中進行超聲清洗3～5分鐘后自然晾干24小時。

4、棘頭梅童魚耳石樣本微區(qū)分析