[發明專利]基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法

無效

• 申請號: 201210328479.2
• 申請日: 2012-09-06
• 公開（公告）號: CN102866185A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 李麗東;黃曉青;衣曉輝;律宇豐
• 申請（專利權）人: 北京航空航天大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/327
• 代理公司: 北京永創新實專利事務所 11121
• 代理人: 姜榮麗

1.基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：

第一步：金電極的預處理；

第二步：對氨基苯硫酚p-ATP的配制：以無水乙醇為溶劑，向溶劑中加入p-ATP，得到p-ATP的乙醇溶液；

第三步：在金電極上修飾p-ATP：將第一步處理好的金電極在室溫下浸泡于p-ATP乙醇溶液中；然后用乙醇和去離子水沖洗，氮氣吹干；

第四步：在修飾了p-ATP的金電極上修飾金納米顆粒；

第五步：DNA適配體的配制與準備；

第六步：在修飾了金納米顆粒的金電極上修飾DNA適配體；

第七步：除去散亂修飾到金電極表面的DNA適配體；

第八步：進行鉀離子的檢測。

2.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：所述的金電極預處理，具體為：

(a)在70°C條件下將金電極浸入體積比為3：1的濃H₂SO₄和質量分數為30%的H₂O₂組成的溶液中清洗，然后用二次水沖洗；

(b)然后，金電極要連續的分別用1.0μm，0.3μm和0.05μm的氧化鋁粉末在拋光布上拋光；

(c)然后將金電極在乙醇和二次水中超聲清洗；

(d)最后，金電極在0.5mol?L^-1的H₂SO₄溶液中，在-0.2和+1.6V之間進行循環伏安掃描，直到獲得典型的循環伏安譜圖，這樣一個干凈的金電極就得到了。

3.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第二步中p-ATP的乙醇溶液的濃度為8-12mM。

4.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第三步中金電極浸泡在p-ATP的乙醇溶液中的時間為24小時以上。

5.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第四步具體為：將制備好的金納米顆粒溶膠滴加到修飾了p-ATP的金電極表面，室溫下放置10小時以上，直到金電極表面的金溶膠干掉；用水沖洗，并用氮氣吹干。

6.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：所述的金納米顆粒的直徑為13-17nm。

7.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第五步具體為：將含有1mM三（2-羰基乙基）磷鹽酸鹽及1μM?DNA的Tris-HCl緩沖溶液加熱70-90℃，恒溫保持5-10分鐘，然后逐漸冷卻到室溫。

8.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第六步具體為：移取15-25μL?DNA適配體溶液滴加到第四步處理好的金電極上，在100%濕度條件下室溫放置12小時以上，分別用Tris-HCl緩沖液和去離子水沖洗，氮氣吹干。

9.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第七步具體為：滴加15-25μL?1mM的MCH到第六步處理好的電極表面，在100%濕度條件下室溫放置30分鐘，然后分別用Tris-HCl緩沖液和去離子水沖洗，氮氣吹干。

10.根據權利要求1所述的基于G-四鏈體和金納米顆粒制備生物傳感器檢測鉀離子的方法，其特征在于：第八步中利用方波伏安法對不同濃度的鉀離子進行測量，掃描范圍是0-0.6V。